中文
Effek van temperatuurvariasie op selkultuur
Temperatuur is 'n belangrike parameter in die selkultuur omdat dit die reproduceerbaarheid van resultate beïnvloed. Temperatuurveranderinge bo of onder 37 ° C het 'n baie beduidende effek op die selgroei -kinetika van soogdierselle, soortgelyk aan dié van bakteriese selle. Veranderings in geenuitdrukking en modifikasies in sellulêre struktuur, progressie van die sel siklus, mRNA -stabiliteit kan na een uur by 32 ° C in soogdierselle opgespoor word. Benewens die selgroei wat die selgroei direk beïnvloed, beïnvloed veranderinge in temperatuur ook die pH van die media, aangesien die oplosbaarheid van CO2 die pH verander (pH neem toe by laer temperature). Gekweekte soogdierselle kan beduidende temperatuurverleding verdra. Dit kan 'n paar dae by 4 ° C geberg word en dit kan vries tot -196 ° C (met toepaslike toestande). Hulle kan egter nie langer as 'n paar uur temperatuur bo ongeveer 2 ° C bo normaal verdra nie en sal vinnig by 40 ° C en hoër sterf. Om die maksimum reproduceerbaarheid van die resultate te verseker, selfs as die selle oorleef, moet daar sorg gedra word om die temperatuur so konstant as moontlik te handhaaf tydens die inkubasie en hantering van die selle buite die broeikas.
Redes vir temperatuurvariasies in die broeikas
U sal opgemerk het dat die temperatuur vinnig daal as die deur van die broeikas oopgemaak word tot die vasgestelde waarde van 37 ° C. Oor die algemeen sal die temperatuur binne 'n paar minute nadat die deur gesluit is, herstel. In werklikheid het statiese kulture tyd nodig om na die vasgestelde temperatuur in die broeikas te herstel. 'N Aantal faktore kan die tyd wat dit neem vir 'n selkultuur om temperatuur te herwin na behandeling buite die broeikas beïnvloed. Hierdie faktore sluit in ：
- ▶ Die tydsduur van die selle is buite die broeikas
- ▶ Die tipe kol waarin die selle gekweek word (meetkunde beïnvloed hitte -oordrag)
- ▶ Aantal houers in die broeikas.
- ▶ Direkte kontak van die kolwe met die staalrak beïnvloed die hitte -uitruiling en die spoed om die optimale temperatuur te bereik, dus dit is beter om stapels kolwe te vermy en om elke vaartuig te plaas
- ▶ Direk op die rak van die broeikas.
Die aanvanklike temperatuur van vars houers en media wat gebruik word, sal ook die tyd wat dit neem om die selle in hul optimale toestand te hê, beïnvloed; Hoe laer hul temperatuur, hoe langer neem dit.
As al hierdie faktore mettertyd verander, sal dit ook die veranderlikheid tussen eksperimente verhoog. Dit is nodig om hierdie temperatuurskommelings tot die minimum te beperk, selfs al is dit nie altyd moontlik om alles te beheer nie (veral as verskeie mense dieselfde broeikas gebruik).
Hoe om temperatuurvariasies te verminder en die temperatuurhersteltyd te verminder
Deur die medium te verhit
Sommige navorsers is gewoond daaraan om die hele bottels media in 'n waterbad van 37 ° C vooraf te verwarm om dit voor gebruik te maak. Dit is ook moontlik om die medium te verhit in 'n broeikas wat slegs gebruik word vir mediumvoorverhitting en nie vir selkultuur nie, waar die medium 'n optimale temperatuur kan bereik sonder om die selkulture in 'n ander broeikas te versteur. Maar dit is, sover ons weet, gewoonlik nie 'n bekostigbare uitgawe nie.
Binne die broeikas
Maak die broeikasdeur so min as moontlik oop en maak dit so vinnig toe. Vermy koue kolle, wat temperatuurverskille in die broeikas skep. Laat die ruimte tussen die kolke laat om lug te laat sirkuleer. Die rakke in die broeikas kan geperforeer word. Dit maak voorsiening vir beter hitteverspreiding, aangesien dit lug deur die gate kan laat gaan. Die teenwoordigheid van gate kan egter lei tot verskille in selgroei, want daar is 'n temperatuurverskil tussen die gebied met gate en die gebied met meta. Om hierdie redes, as u eksperimente baie eenvormige groei van die selkultuur benodig, kan u die kultuurfluitjies op metaalondersteuning met kleiner kontakoppervlaktes plaas, wat gewoonlik nie nodig is in die roetine -selkultuur nie.
Die vermindering van selverwerkingstyd
Om die tydbesteding in die selbehandelingsproses te verminder, moet u dit doen
- ▶ Organiseer al die nodige materiale en gereedskap voordat u begin werk.
- ▶ Werk vinnig en glad en hersien vooraf eksperimentele metodes sodat u bewerkings herhalend en outomaties word.
- ▶ Minimaliseer die kontak van vloeistowwe met omringende lug.
- ▶ Handhaaf 'n konstante temperatuur in die selkultuurlaboratorium waar u werk.
Postyd: Jan-03-2024