Hoe om die korrekte skudderamplitude te kies?
Wat is die amplitude van 'n skudder?
Die amplitude van 'n skudder is die deursnee van die palet in sirkelbeweging, soms die "ossillasiedeursnee" of "baandeursnee"-simbool genoem: Ø. Radobio bied standaardskudders met amplitudes van 3 mm, 25 mm, 26 mm en 50 mm. Aangepaste skudders met ander amplitudegroottes is ook beskikbaar.
Wat is suurstofoordragtempo (OTR)?
Suurstofoordragtempo (OTR) is die doeltreffendheid van suurstof wat van die atmosfeer na die vloeistof oorgedra word. Hoe hoër die OTR-waarde, hoe hoër die suurstofoordragdoeltreffendheid.
Effek van Amplitude en Rotasiespoed
Beide hierdie faktore beïnvloed die vermenging van die medium in die kweekfles. Hoe beter die vermenging, hoe beter die suurstofoordragtempo (OTR). Deur hierdie riglyne te volg, kan die mees geskikte amplitude en rotasiespoed gekies word.
Oor die algemeen kan die keuse van 'n amplitude van 25 mm of 26 mm as 'n universele amplitude vir alle kultuurtoepassings gebruik word.
Bakteriële, gis- en swamkulture:
Suurstofoordrag in skudflesse is baie minder doeltreffend as in bioreaktore. Suurstofoordrag kan in die meeste gevalle die beperkende faktor vir skudflessekulture wees. Die amplitude hou verband met die grootte van die koniese flesse: groter flesse gebruik groter amplitudes.
Aanbeveling: 25 mm amplitude vir koniese flesse van 25 ml tot 2000 ml.
50 mm amplitude vir koniese flesse van 2000 ml tot 5000 ml.
Selkultuur:
* Soogdierselkulture het 'n relatief lae suurstofbehoefte.
* Vir 250 ml-skudkolwe kan voldoende suurstoftoevoer oor 'n relatief wye reeks amplitudes en snelhede (20-50 mm amplitude; 100-300 rpm) verskaf word.
* Vir flesse met groter deursnee (Fernbach-flesse) word 'n amplitude van 50 mm aanbeveel.
* Indien weggooibare kultuursakke gebruik word, word 'n amplitude van 50 mm aanbeveel.
Mikrotiter- en diepputplate:
Vir mikrotiter- en diepputplate is daar twee verskillende metodes om maksimum suurstofoordrag te verkry!
* 50 mm amplitude teen 'n spoed van nie minder nie as 250 rpm.
* Gebruik 3 mm amplitude teen 800-1000 rpm.
In baie gevalle, selfs al word 'n redelike amplitude gekies, mag dit nie die biokultuurvolume verhoog nie, omdat die toename in volume deur verskeie faktore beïnvloed kan word. Byvoorbeeld, as een of twee van die tien faktore nie ideaal is nie, sal die toename in kultuurvolume beperk wees, ongeag hoe goed die ander faktore is, of daar kan aangevoer word dat die korrekte keuse van amplitude 'n merkbare toename in die inkubator sal tot gevolg hê as die enigste beperkende faktor vir kultuurvolume suurstoftoevoer is. Byvoorbeeld, as die koolstofbron die beperkende faktor is, ongeag hoe goed die suurstofoordrag is, sal die verlangde kultuurvolume nie bereik word nie.
Amplitude en Rotasiespoed
Beide amplitude en rotasiespoed kan 'n effek op suurstofoordrag hê. As selkulture teen baie lae rotasiesnelhede gekweek word (bv. 100 rpm), het verskille in amplitude min of geen merkbare effek op suurstofoordrag nie. Om die hoogste suurstofoordrag te bereik, is die eerste stap om die rotasiespoed soveel as moontlik te verhoog, en die bakkie sal behoorlik gebalanseer wees vir spoed. Nie alle selle kan goed groei met hoëspoed-ossillasies nie, en sommige selle wat sensitief is vir skuifkragte kan sterf as gevolg van hoë rotasiesnelhede.
Ander invloede
Ander faktore kan 'n effek op suurstofoordrag hê:.
* Vulvolume, koniese flesse moet tot nie meer as een derde van die totale volume gevul word nie. Indien maksimum suurstofoordrag bereik moet word, vul tot nie meer as 10% nie. Moet nooit tot 50% vul nie.
* Bederfies: Bederfies is effektief om suurstofoordrag in alle soorte kulture te verbeter. Sommige vervaardigers beveel die gebruik van "Ultra High Yield"-flesse aan. Die bederfies op hierdie flesse verhoog vloeistofwrywing en die skudder bereik moontlik nie die maksimum ingestelde spoed nie.
Korrelasie tussen amplitude en spoed
Die sentrifugale krag in 'n skudder kan bereken word deur die volgende vergelyking te gebruik
FC = rpm2× amplitude
Daar is 'n lineêre verband tussen sentrifugale krag en amplitude: as jy 'n amplitude van 25 mm tot 'n amplitude van 50 mm (teen dieselfde spoed) gebruik, neem die sentrifugale krag met 'n faktor van 2 toe.
Daar bestaan 'n kwadraatverhouding tussen sentrifugale krag en rotasiespoed.
As die spoed met 'n faktor van 2 verhoog word (dieselfde amplitude), neem die sentrifugale krag met 'n faktor van 4 toe. As die spoed met 'n faktor van 3 verhoog word, neem die sentrifugale krag met 'n faktor van 9 toe!
As jy 'n amplitude van 25 mm gebruik, inkubeer teen 'n gegewe spoed. As jy dieselfde sentrifugale krag met 'n amplitude van 50 mm wil bereik, moet die rotasiespoed bereken word as die vierkantswortel van 1/2, dus moet jy 70% van die rotasiespoed gebruik om dieselfde inkubasietoestande te bereik.
Let asseblief daarop dat bogenoemde slegs 'n teoretiese metode is om sentrifugale krag te bereken. Daar is ander beïnvloedende faktore in werklike toepassings. Hierdie berekeningsmetode gee benaderde waardes vir operasionele doeleindes.
Plasingstyd: Jan-03-2024