Temperatur dəyişkənliyinin hüceyrə mədəniyyətinə təsiri
Temperatur hüceyrə mədəniyyətində mühüm parametrdir, çünki o, nəticələrin təkrar istehsalına təsir göstərir. 37°C-dən yuxarı və ya aşağı temperatur dəyişiklikləri bakteriya hüceyrələrinə bənzər məməlilərin hüceyrələrinin böyümə kinetikasına çox əhəmiyyətli təsir göstərir. Gen ifadəsindəki dəyişikliklər və hüceyrə quruluşunda dəyişikliklər, hüceyrə dövrünün irəliləməsi, mRNT sabitliyi 32ºC-də bir saatdan sonra məməli hüceyrələrində aşkar edilə bilər. Hüceyrə artımına birbaşa təsir etməklə yanaşı, temperaturun dəyişməsi də mühitin pH-ına təsir göstərir, çünki CO2-nin həll olması pH-ı dəyişir (aşağı temperaturda pH artır). Yetişdirilmiş məməli hüceyrələri əhəmiyyətli temperatur azalmalarına dözə bilir. Onlar bir neçə gün ərzində 4 °C temperaturda saxlanıla bilər və -196 °C-ə qədər (uyğun şəraitdən istifadə etməklə) donmağa dözə bilirlər. Bununla belə, onlar normadan təxminən 2 °C-dən yuxarı temperatura bir neçə saatdan çox dözə bilmirlər və 40 °C və daha yüksək temperaturda tez ölürlər. Nəticələrin maksimum təkrarlanmasını təmin etmək üçün, hətta hüceyrələr sağ qalsa belə, inkubasiya zamanı və inkubatordan kənar hüceyrələrin idarə olunması zamanı temperaturun mümkün qədər sabit saxlanmasına diqqət yetirilməlidir.
İnkubator daxilində temperaturun dəyişməsinin səbəbləri
İnkubatorun qapısı açıldıqda temperaturun sürətlə təyin olunmuş 37 °C dəyərinə düşdüyünü görmüsünüz. Ümumiyyətlə, qapı bağlandıqdan sonra temperatur bir neçə dəqiqə ərzində bərpa olunacaq. Əslində, statik mədəniyyətlərin inkubatorda müəyyən edilmiş temperatura qayıtması üçün vaxt lazımdır. Hüceyrə mədəniyyətinin inkubatordan kənarda müalicədən sonra temperaturu bərpa etməsi üçün lazım olan vaxta bir sıra amillər təsir edə bilər. Bu amillərə aşağıdakılar daxildir:
- ▶hüceyrələrin inkubatordan çıxma müddəti
- ▶hüceyrələrin yetişdirildiyi kolbanın növü (həndəsə istilik ötürülməsinə təsir göstərir)
- ▶İnkubatordakı qabların sayı .
- ▶Kolbaların polad rəflə birbaşa təması istilik mübadiləsinə və optimal temperatura çatma sürətinə təsir edir, ona görə də kolba yığınlarından qaçmaq və hər bir qabı yerləşdirmək daha yaxşıdır.
- ▶birbaşa inkubatorun rəfində.
İstifadə olunan hər hansı təzə qabların və medianın ilkin temperaturu hüceyrələrin optimal vəziyyətdə olması üçün lazım olan vaxta da təsir edəcək; onların temperaturu nə qədər aşağı olarsa, bir o qədər uzun çəkir.
Bütün bu amillər zamanla dəyişərsə, təcrübələr arasında dəyişkənliyi də artırar. Hər şeyə nəzarət etmək həmişə mümkün olmasa belə (xüsusilə bir neçə nəfər eyni inkubatordan istifadə edirsə) bu temperatur dalğalanmalarını minimuma endirmək lazımdır.
Temperatur dəyişikliklərini minimuma endirmək və temperaturun bərpa müddətini necə azaltmaq olar
Ortanı əvvəlcədən qızdırmaqla
Bəzi tədqiqatçılar istifadə etməzdən əvvəl onları bu temperatura çatdırmaq üçün 37 °C su banyosunda bütün şüşə qabları əvvəlcədən isitməyə adət etmişlər. Mühitin başqa bir inkubatorda hüceyrə kulturalarını pozmadan optimal temperatura çata bildiyi hüceyrə kulturası üçün deyil, yalnız orta əvvəlcədən isitmə üçün istifadə edilən inkubatorda mühiti əvvəlcədən qızdırmaq da mümkündür. Amma bu, bildiyimizə görə, adətən sərfəli xərc deyil.
İnkubatorun içərisində
İnkubatorun qapısını mümkün qədər az açın və tez bağlayın. İnkubatorda temperatur fərqləri yaradan soyuq ləkələrdən çəkinin. Havanın sirkulyasiyası üçün şüşələr arasında boşluq buraxın. İnkubatorun içindəki rəflər perforasiya edilə bilər. Bu, havanın deşiklərdən keçməsinə imkan verdiyi üçün daha yaxşı istilik paylanmasına imkan verir. Bununla belə, deşiklərin olması hüceyrə artımında fərqliliklərə səbəb ola bilər, çünki deşikli sahə ilə meta olan sahə arasında temperatur fərqi var. Bu səbəblərə görə, əgər təcrübələriniz hüceyrə mədəniyyətinin yüksək dərəcədə vahid böyüməsini tələb edirsə, kultur kolbalarını daha kiçik kontakt səthləri olan metal dayaqların üzərinə yerləşdirə bilərsiniz, bu isə adətən adi hüceyrə mədəniyyətində lazım deyil.
Hüceyrə emal vaxtının minimuma endirilməsi
Hüceyrə müalicəsi prosesində sərf olunan vaxtı minimuma endirmək üçün lazımdır
- ▶İşə başlamazdan əvvəl bütün lazımi materialları və alətləri sıralayın.
- ▶Əməliyyatlarınızın təkrarlanması və avtomatlaşdırılması üçün təcrübi metodları əvvəlcədən nəzərdən keçirərək tez və rəvan işləyin.
- ▶Mayelərin ətraf hava ilə təmasını minimuma endirin.
- ▶İşlədiyiniz hüceyrə kulturası laboratoriyasında sabit temperaturu qoruyun.
Göndərmə vaxtı: 03 yanvar 2024-cü il