Как да избера правилната амплитуда на шейкър?
Каква е амплитудата на шейкър?
Амплитудата на шейкър е диаметърът на палета при кръгово движение, понякога наричан символ „диаметър на трептене“ или „диаметър на пистата“: Ø. Radobio предлага стандартни шейкъри с амплитуди от 3 мм, 25 мм, 26 мм и 50 мм ,. Предлагат се и персонализирани шейкъри с други размери на амплитудата.
Каква е скоростта на пренос на кислород (OTR)?
Скоростта на пренос на кислород (OTR) е ефективността на кислорода се прехвърля от атмосферата в течността. Колкото по -висока е стойността на OTR означава, толкова по -висока е ефективността на пренос на кислород.
Ефект от амплитудата и скоростта на въртене
И двата фактора влияят на смесването на средата в културната колба. Колкото по -добре е смесването, толкова по -добра е скоростта на пренос на кислород (OTR). Следвайки тези указания, могат да бъдат избрани най -подходящата амплитуда и скорост на въртене.
Като цяло, избирането на амплитуда от 25 мм или 26 мм може да се използва като универсална амплитуда за всички приложения за култура.
Бактериални, дрожди и гъбични култури:
Прехвърлянето на кислород в колби на шейк е много по -малко ефективно, отколкото при биореактори. Прехвърлянето на кислород може да бъде ограничаващият фактор за културите на Shake Flask в повечето случаи. Амплитудата е свързана с размера на коничните колби: по -големите колби използват по -големи амплитуди.
Препоръка: Амплитуда на 25 мм за конични колби от 25ml до 2000ml.
Амплитуда от 50 mm за конични колби от 2000 ml до 5000 ml.
Клетъчна култура:
* Клетъчната култура на бозайниците има сравнително ниско изискване за кислород.
* За 250ml колби на шейкър може да се осигури достатъчно доставяне на кислород в сравнително широк диапазон от амплитуди и скорости (амплитуда 20-50 мм; 100-300rpm).
* За колби с по -голям диаметър (колби на Fernbach) се препоръчва амплитуда от 50 mm.
* Ако се използват чанти за култура за еднократна употреба, се препоръчва амплитуда от 50 мм.
Микротитър и плочи с дълбоки яздове:
За микротитър и плочи с дълбока ямка има два различни метода за получаване на максимален трансфер на кислород!
* 50 mm амплитуда със скорост не по -малка от 250 rpm.
* Използвайте 3 мм амплитуда при 800-1000 об / мин.
В много случаи, дори ако е избрана разумна амплитуда, това може да не увеличи обема на биокултурата, тъй като увеличаването на обема може да бъде повлияно от няколко фактора. Например, ако един или два от десетте фактора не са идеални, тогава увеличаването на обема на културата ще бъде ограничено, независимо колко добри са другите фактори, или може да се твърди, че правилният избор на амплитуда ще доведе до забележимо увеличение В инкубатора, ако единственият ограничаващ фактор за обема на културата е доставянето на кислород. Например, ако източникът на въглерод е ограничаващият фактор, колкото и добър да е пренос на кислород, желаният обем на културата няма да бъде постигнат.
Амплитуда и скорост на въртене
Както амплитудата, така и скоростта на въртене могат да окажат влияние върху трансфера на кислород. Ако клетъчните култури се отглеждат при много ниски скорости на въртене (напр. 100 об / мин), разликите в амплитудата имат малък или никакъв забележим ефект върху преноса на кислород. За да се постигне най -високият трансфер на кислород, първата стъпка е да се увеличи скоростта на въртене, доколкото е възможно, и тавата ще бъде правилно балансирана за скорост. Не всички клетки могат да растат добре с колебания с висока скорост и някои клетки, които са чувствителни към срязващите сили, могат да умрат от високи скорости на въртене.
Други влияния
Други фактори могат да окажат влияние върху трансфера на кислород :.
* Обемът на пълнене, коничните колби трябва да бъдат запълнени до не повече от една трета от общия обем. Ако трябва да се постигне максимален пренос на кислород, попълнете не повече от 10%. Никога не попълвайте до 50%.
* Спойлери: Спойлерите са ефективни за подобряване на трансфера на кислород във всички видове култури. Някои производители препоръчват използването на колби „ултра висок добив“. Спойлерите на тези колби увеличават течното триене и шейкърът може да не достигне максималната зададена скорост.
Корелация между амплитудата и скоростта
Центробежната сила в шейкър може да се изчисли, като се използва следното уравнение
Fc = rpm2× Амплитуда
Има линейна връзка между центробежна сила и амплитуда: Ако използвате амплитуда от 25 mm до амплитуда от 50 mm (със същата скорост), центробежната сила се увеличава с коефициент 2.
Една квадратна връзка съществува между центробежна сила и скорост на въртене.
Ако скоростта се увеличи с коефициент 2 (същата амплитуда), центробежната сила се увеличава с коефициент 4. Ако скоростта се увеличи с коефициент 3, центробежната сила се увеличава с коефициент 9!
Ако използвате амплитуда от 25 mm, инкубирайте с дадена скорост. Ако искате да постигнете същата центробежна сила с амплитуда 50 mm, скоростта на въртене трябва да се изчислява като квадратен корен от 1/2, така че трябва да използвате 70% от скоростта на въртене, за да постигнете същите условия на инкубация.

Моля, обърнете внимание, че горното е само теоретичен метод за изчисляване на центробежна сила. Има и други влияещи фактори в реалните приложения. Този метод на изчисление дава приблизителни стойности за оперативни цели.
Време за публикация: SEP-10-2023