中文
Efiko de temperatur -variado sur ĉelkulturo
Temperaturo estas grava parametro en ĉela kulturo ĉar ĝi influas la reprodukteblecon de rezultoj. Temperaturaj ŝanĝoj super aŭ sub 37 ° C havas tre signifan efikon sur la kinetika ĉel -kresko de mamulaj ĉeloj, simila al tiu de bakteriaj ĉeloj. Ŝanĝoj en gena esprimo kaj modifoj en ĉela strukturo, ĉela ciklo -progresado, mRNA -stabileco povas esti detektitaj en mamulaj ĉeloj post unu horo je 32ºC. Krom rekte influi ĉelan kreskon, ŝanĝoj en temperaturo ankaŭ influas la pH de la amaskomunikilaro, ĉar la solvebleco de CO2 ŝanĝas la pH (pH pliiĝas je pli malaltaj temperaturoj). Kulturaj mamulaj ĉeloj povas toleri signifan temperaturon malpliiĝas. Ili povas esti stokitaj je 4 ° C dum pluraj tagoj kaj povas toleri frostadon al -196 ° C (uzante taŭgajn kondiĉojn). Tamen ili ne povas toleri temperaturojn super ĉirkaŭ 2 ° C super normala dum pli ol kelkaj horoj kaj mortos rapide je 40 ° C kaj pli. Por certigi maksimuman reprodukteblecon de rezultoj, eĉ se la ĉeloj postvivas, necesas zorgo por konservi la temperaturon kiel eble plej konstantan dum la kovado kaj uzado de la ĉeloj ekster la inkubatoro.
Kialoj de temperaturaj variadoj ene de la inkubatoro
Vi rimarkos, ke kiam la inkuba pordo malfermiĝas, la temperaturo falas rapide al la fiksita valoro de 37 ° C. Ĝenerale, la temperaturo resaniĝos post kelkaj minutoj post kiam la pordo estos fermita. Fakte, statikaj kulturoj bezonas tempon por resaniĝi al la fiksita temperaturo en la inkubatoro. Multaj faktoroj povas influi la tempon necesan por ĉela kulturo por regajni temperaturon post kuracado ekster la inkubatoro. Ĉi tiuj faktoroj inkluzivas ：
- ▶ La tempodaŭro la ĉeloj estis ekster la inkubatoro
- ▶ La tipo de flasko en kiu la ĉeloj estas kreskigitaj (geometrio influas varmotransigon)
- ▶ Nombro de ujoj en la inkubatoro.
- ▶ Rekta kontakto de la flaskoj kun la ŝtala breto efikas sur la varmoŝanĝo kaj la rapidecon atingi la optimuman temperaturon, do estas pli bone eviti stakojn de flaskoj kaj meti ĉiun vazon
- ▶ Rekte sur la breto de la inkubatoro.
La komenca temperaturo de iuj freŝaj ujoj kaj amaskomunikiloj uzataj ankaŭ influos la tempon necesan por ke la ĉeloj estu ĉe sia optimuma stato; Ju pli malalta estas ilia temperaturo, des pli longe ĝi daŭras.
Se ĉiuj ĉi tiuj faktoroj ŝanĝiĝos kun la tempo, ili ankaŭ pliigos la variecon inter eksperimentoj. Necesas minimumigi ĉi tiujn temperaturfluojn, eĉ se ne ĉiam eblas kontroli ĉion (precipe se pluraj homoj uzas la saman inkubatoron).
Kiel minimumigi temperaturajn variaĵojn kaj redukti temperaturan reakiron
Per hejtado de la mediumo
Iuj esploristoj kutimas antaŭ-varmigi tutajn botelojn da amaskomunikiloj en akva bano de 37 ° C por alporti ilin al ĉi tiu temperaturo antaŭ uzo. Eblas ankaŭ varmigi la mediumon en inkubatoro, kiu estas uzata nur por meza antaŭcalentado kaj ne por ĉelkulturo, kie la mediumo povas atingi optimuman temperaturon sen ĝeni la ĉelkulturojn en alia inkubatoro. Sed ĉi tio, kiom ni scias, kutime ne estas atingebla elspezo.
Ene de la inkubatoro
Malfermu la pordon de la inkubatoro kiel eble plej malmulte kaj fermu ĝin kiel rapide. Evitu malvarmajn makulojn, kiuj kreas diferencojn de temperaturo en la inkubatoro. Lasu spacon inter la flaskoj por permesi aeron cirkuli. La bretoj ene de la inkubatoro povas esti boritaj. Ĉi tio ebligas pli bonan varmodistribuon, ĉar ĝi permesas al aero trapasi la truojn. Tamen, la ĉeesto de truoj povas konduki al diferencoj en ĉela kresko, ĉar ekzistas temperatura diferenco inter la areo kun truoj kaj la areo kun meta. Por ĉi tiuj kialoj, se viaj eksperimentoj postulas tre unuforman kreskon de la ĉela kulturo, vi povas meti la kulturajn flaskojn sur metalajn subtenojn kun pli malgrandaj kontaktaj surfacoj, kiuj kutime ne estas necesaj en rutina ĉela kulturo.
Minimumigante ĉelan pretigan tempon
Por minimumigi la tempon pasigi en ĉela kuracprocezo, vi devas
- ▶ Organizi ĉiujn necesajn materialojn kaj ilojn antaŭ ol vi komencas labori.
- ▶ Laboru rapide kaj glate, reviziante eksperimentajn metodojn anticipe por ke viaj operacioj fariĝu ripetemaj kaj aŭtomatigitaj.
- ▶ Minimumigi kontakton de likvaĵoj kun ĉirkaŭa aero.
- ▶ Subtenu konstantan temperaturon en la ĉela kulturo -laboratorio, kie vi laboras.
Afiŝotempo: Jan-03-2024