Buaidh eadar-dhealachadh teòthachd air cultar cealla
Tha teòthachd na paramadair cudromach ann an cultar cealla oir tha e a 'toirt buaidh air ath-riochdachadh thoraidhean. Bidh an teòthachd ag atharrachadh gu h-àrd no fo 37 ° C air 37 ° C a thoirt air fàis ceilichte cealnnan mamalan, coltach ri ceallan bacterial. Changes in gene expression and modifications in cellular structure, cell cycle progression, mRNA stability can be detected in mammalian cells after one hour at 32ºC. In addition to directly affecting cell growth, changes in temperature also affect the pH of the media, as the solubility of CO2 alters the pH (pH increases at lower temperatures). Faodaidh ceallan mammalian cultair a bhith a 'gabhail ri lughdachadh teothachd cudromach. Faodar an stòradh aig 4 ° C airson grunn làithean agus faodaidh iad fhulantadh gu -196 ° C (a 'cleachdadh cumhachan iomchaidh). Ach, chan urrainn dhaibh a bhith a 'fulang le teòthachd os cionn mu 2 ° C os cionn àbhaisteach airson barrachd air beagan uairean a-thìde agus gheibh iad bàs gu sgiobalta aig 40 ° C agus gu h-àrd. To ensure maximum reproducibility of results, even if the cells survive, care needs to be taken to maintain the temperature as constant as possible during the incubation and handling of the cells outside the incubator.
Adhbharan airson atharrachaidhean san taobh a-staigh an gabhalaiche
Bidh thu air mothachadh nuair a thèid doras an comas fhosgladh, a 'tuiteam gu luath ri luach seata 37 ° C. San fharsaingeachd, gheibh an teòthachd seachad taobh a-staigh beagan mhionaidean às deidh don doras a dhùnadh. Gu dearbh, feumaidh cultaran statach ùine airson faighinn seachad air teòthachd an t-suidheachaidh anns an neach-giùlain. Faodaidh grunn nithean buaidh a thoirt air an ùine a bheir e airson cultar cealla a bhith a 'faighinn tuineachadh air ais às deidh leigheas taobh a-muigh an neach-ionaid.Tha na factaran sin a 'toirt a-steach:
- ▶ An ùine a tha na ceallan air a bhith a-mach às an neach-giùlain
- ▶ An seòrsa flasg anns a bheil na ceallan air am fàs (bidh geoimeatraidh a 'toirt buaidh air gluasad teas)
- ▶ Àireamh de shoithichean anns an neach-giùlain.
- ▶ gu dìreach air sgeilp an gabhaltach.
Bheir an teòthachd tùsail soithichean agus meadhanan a chaidh a chleachdadh cuideachd buaidh air an ùine a bheir e airson na ceallan a bhith aig an stàit as fheàrr aca; an teòthachd as ìsle, rud nas fhaide a bheir e.
Ma dh 'atharraicheas na feartan sin uile thar ùine, meudaichidh iad an eadar -ochachd eadar deuchainnean. It is necessary to minimize these temperature fluctuations, even if it is not always possible to control everything (especially if several people are using the same incubator).
Mar a lughdaicheadh tu atharrachaidhean teòthachd agus a lughdachadh ùine faighinn air ais theòthachd
Le bhith a 'ro-shealladh air a' mheadhan
Tha cuid de luchd-rannsachaidh cleachdte ri bhith a 'blàthachadh botail slàn de mheadhanan ann an amar uisge 37 ° gus an toirt don teòthachd seo mus deach an cleachdadh. It is also possible to preheat the medium in an incubator that is only used for medium preheating and not for cell culture, where the medium can reach an optimal temperature without disturbing the cell cultures in another incubator. Ach mar as trice chan eil seo na chosgais aig, mar as trice.
Taobh a-staigh an neach-ionaid
Fosgail doras an inusag maorach cho beag 's a ghabhas agus dùin e cho luath. Seachain spotan fuar, a chruthaicheas eadar-dhealachaidhean teodhach san neach-giùlain. Fàg àite eadar na flasgaichean gus leigeil le èadhar a chuairteachadh. Faodar na sgeilpichean a-staigh an neach a bhogamaiche a chasg. Leigidh seo le sgaoileadh teas nas fheàrr oir tha e a 'leigeil le èadhar a dhol tro na tuill. However, the presence of holes can lead to differences in cell growth, because there is a temperature difference between the area with holes and the area with meta. For these reasons, if your experiments require highly uniform growth of the cell culture, you can place the culture flasks on metal supports with smaller contact surfaces, which are usually not necessary in routine cell culture.
A 'lughdachadh ùine giullachd cealla
Gus an ùine a lughdachadh ann am pròiseas làimhseachaidh cealla, feumaidh tu
- ▶ Cuir air dòigh na stuthan agus na h-innealan riatanach uile mus tòisich thu ag obair.
- ▶ obraich gu sgiobalta agus gu rèidh, ag ath-bhreithneachadh air modhan deuchainneach ro-làimh gus am bi na h-obraichean agad ath-ghnìomhach agus fèin-ghluasadach.
- ▶ lughdachadh conaltradh de liquids le èadhar àrainneachd.
- ▶ Cùm teòthachd seasmhach anns an loidhne cultair cealla far a bheil thu ag obair.
Ùine a 'phuist: Lùnastal-18-2023