中文
सेल संस्कृति पर तापमान भिन्नता का प्रभाव
तापमान सेल संस्कृति में एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है क्योंकि यह परिणामों की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता को प्रभावित करता है। 37 डिग्री सेल्सियस से ऊपर या उससे नीचे तापमान में परिवर्तन बैक्टीरिया कोशिकाओं के समान स्तनधारी कोशिकाओं के कोशिका वृद्धि कैनेटीक्स पर बहुत महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन और सेलुलर संरचना में संशोधन, सेल चक्र प्रगति, mRNA स्थिरता को स्तनधारी कोशिकाओं में 32 .C पर एक घंटे के बाद पता लगाया जा सकता है। सेल के विकास को सीधे प्रभावित करने के अलावा, तापमान में परिवर्तन मीडिया के पीएच को भी प्रभावित करते हैं, क्योंकि CO2 की घुलनशीलता PH (पीएच कम तापमान पर बढ़ती है) को बदल देती है। संवर्धित स्तनधारी कोशिकाएं महत्वपूर्ण तापमान में कमी को सहन कर सकती हैं। उन्हें कई दिनों के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है और -196 डिग्री सेल्सियस (उचित शर्तों का उपयोग करके) तक ठंड को सहन कर सकते हैं। हालांकि, वे कुछ घंटों से अधिक के लिए सामान्य से ऊपर 2 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान को बर्दाश्त नहीं कर सकते हैं और 40 डिग्री सेल्सियस और उससे अधिक समय पर जल्दी मर जाएंगे। परिणामों की अधिकतम प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता सुनिश्चित करने के लिए, भले ही कोशिकाएं जीवित रहें, इनक्यूबेटर के बाहर कोशिकाओं के ऊष्मायन और हैंडलिंग के दौरान तापमान को यथासंभव स्थिर बनाए रखने के लिए देखभाल की आवश्यकता है।
इनक्यूबेटर के अंदर तापमान भिन्नता के कारण
आपने देखा होगा कि जब इनक्यूबेटर दरवाजा खोला जाता है, तो तापमान तेजी से 37 डिग्री सेल्सियस के सेट मान पर गिरता है। सामान्य तौर पर, दरवाजा बंद होने के कुछ ही मिनटों के भीतर तापमान ठीक हो जाएगा। वास्तव में, स्थिर संस्कृतियों को इनक्यूबेटर में सेट तापमान को ठीक करने के लिए समय की आवश्यकता होती है। कई कारक इनक्यूबेटर के बाहर उपचार के बाद तापमान हासिल करने के लिए एक सेल संस्कृति के लिए लगने वाले समय को प्रभावित कर सकते हैं। इन कारकों में शामिल हैं।
- ▶ समय की लंबाई कोशिकाओं को इनक्यूबेटर से बाहर कर दिया गया है
- ▶ फ्लास्क का प्रकार जिसमें कोशिकाएं उगाई जाती हैं (ज्यामिति गर्मी हस्तांतरण को प्रभावित करती है)
- Incubator में कंटेनरों की संख्या।
- ▶ स्टील शेल्फ के साथ फ्लास्क का सीधा संपर्क हीट एक्सचेंज और इष्टतम तापमान तक पहुंचने की गति को प्रभावित करता है, इसलिए फ्लास्क के ढेर से बचने और प्रत्येक पोत को रखने के लिए बेहतर है
- ▶ सीधे इनक्यूबेटर के शेल्फ पर।
किसी भी ताजा कंटेनरों और उपयोग किए जाने वाले मीडिया का प्रारंभिक तापमान भी कोशिकाओं को उनके इष्टतम स्थिति में होने के लिए लगने वाले समय को भी प्रभावित करेगा; उनका तापमान जितना कम होता है, उतना ही लंबा होता है।
यदि ये सभी कारक समय के साथ बदलते हैं, तो वे प्रयोगों के बीच परिवर्तनशीलता भी बढ़ाएंगे। इन तापमान में उतार -चढ़ाव को कम करना आवश्यक है, भले ही यह हमेशा सब कुछ नियंत्रित करना संभव न हो (विशेषकर अगर कई लोग एक ही इनक्यूबेटर का उपयोग कर रहे हैं)।
तापमान भिन्नता को कम कैसे करें और तापमान वसूली समय को कम करें
माध्यम को प्रीहीट करके
कुछ शोधकर्ताओं को 37 डिग्री सेल्सियस पानी के स्नान में मीडिया की पूरी बोतलों को पूर्व-गर्म करने के आदी हैं ताकि उन्हें इस तापमान पर लाने के लिए उपयोग किया जा सके। एक इनक्यूबेटर में माध्यम को प्रीहीट करना भी संभव है जो केवल मध्यम प्रीहीटिंग के लिए उपयोग किया जाता है और सेल संस्कृति के लिए नहीं, जहां माध्यम एक अन्य इनक्यूबेटर में सेल संस्कृतियों को परेशान किए बिना एक इष्टतम तापमान तक पहुंच सकता है। लेकिन यह, जहां तक हम जानते हैं, आमतौर पर एक किफायती खर्च नहीं है।
इनक्यूबेटर के अंदर
इनक्यूबेटर डोर को जितना संभव हो उतना कम खोलें और इसे जल्दी से बंद करें। कोल्ड स्पॉट से बचें, जो इनक्यूबेटर में तापमान अंतर पैदा करते हैं। हवा को प्रसारित करने की अनुमति देने के लिए फ्लास्क के बीच की जगह छोड़ दें। इनक्यूबेटर के अंदर की अलमारियों को छिद्रित किया जा सकता है। यह बेहतर गर्मी वितरण के लिए अनुमति देता है क्योंकि यह हवा को छेद से गुजरने की अनुमति देता है। हालांकि, छेदों की उपस्थिति से कोशिका वृद्धि में अंतर हो सकता है, क्योंकि छेद के साथ क्षेत्र और मेटा के साथ क्षेत्र के बीच तापमान अंतर है। इन कारणों के लिए, यदि आपके प्रयोगों को सेल संस्कृति की अत्यधिक समान वृद्धि की आवश्यकता होती है, तो आप छोटे संपर्क सतहों के साथ धातु के समर्थन पर संस्कृति फ्लास्क रख सकते हैं, जो आमतौर पर नियमित सेल संस्कृति में आवश्यक नहीं होते हैं।
सेल प्रसंस्करण समय को कम करना
सेल उपचार प्रक्रिया में समय बिताने के लिए, आपको करने की आवश्यकता है
- ▶ काम शुरू करने से पहले सभी आवश्यक सामग्रियों और उपकरणों को व्यवस्थित करें।
- ▶ जल्दी और सुचारू रूप से काम करें, पहले से प्रयोगात्मक तरीकों की समीक्षा करें ताकि आपके संचालन दोहराव और स्वचालित हो जाएं।
- ▶ परिवेशी हवा के साथ तरल पदार्थों के संपर्क को कम करें।
- ▶ सेल कल्चर लैब में एक निरंतर तापमान बनाए रखें जहां आप काम करते हैं।
पोस्ट टाइम: JAN-03-2024