Efè varyasyon tanperati a sou kilti selil
Tanperati a se yon paramèt enpòtan nan kilti selil paske li afekte repwodibilite nan rezilta yo. Chanjman tanperati ki pi wo a oswa anba 37 ° C gen yon efè trè siyifikatif sou cinétique a kwasans selil nan selil mamifè yo, menm jan ak sa yo ki an selil bakteri. Chanjman nan ekspresyon jèn ak modifikasyon nan estrikti selilè, pwogresyon sik selilè, ka mRNA estabilite ka detekte nan selil mamifè apre yon èdtan nan 32 ºC. Anplis de sa ki afekte dirèkteman kwasans selil, chanjman ki fèt nan tanperati a tou afekte pH la nan medya yo, kòm solubilite nan CO2 transforms pH la (pH ogmante nan pi ba tanperati). Kiltive selil mamifè yo ka tolere siyifikatif diminye tanperati. Yo ka estoke yo nan 4 ° C pou plizyè jou epi yo ka tolere lè w konjele nan -196 ° C (lè l sèvi avèk kondisyon ki apwopriye). Sepandan, yo pa ka tolere tanperati ki pi wo a apeprè 2 ° C pi wo a nòmal pou plis pase kèk èdtan epi yo pral mouri byen vit nan 40 ° C ak pi wo a. Pou asire repwodibilite maksimòm rezilta yo, menm si selil yo siviv, yo dwe pran swen yo pou yo kenbe tanperati a kòm konstan ke posib pandan enkubasyon an ak manyen nan selil yo deyò enkibatè la.
Rezon pou varyasyon tanperati andedan enkibatè a
Ou pral remake ke lè se pòt la enkibatè louvri, tanperati a gout rapid nan valè a mete nan 37 ° C. An jeneral, tanperati a pral refè nan kèk minit apre yo fin pòt la fèmen. An reyalite, kilti estatik bezwen tan refè nan tanperati a mete nan enkibatè la. Yon nimewo de faktè kapab afekte tan an li pran pou yon kilti selil yo reprann tanperati apre tretman deyò enkibatè la.Sa faktè sa yo gen ladan yo:
- ▶ longè tan selil yo te soti nan enkibatè a
- ▶ Kalite flakon kote selil yo grandi (jeyometri afekte transfè chalè)
- ▶ Nimewo nan resipyan nan enkibatè la.
- ▶ Kontak dirèk nan boutèy yo ak etajè a asye afekte echanj la chalè ak vitès la nan rive nan tanperati a pi bon, kidonk li se pi bon pou fè pou evite pil nan boutèy ak mete chak veso
- ▶ dirèkteman sou etajè enkibatè a.
Tanperati inisyal la nan nenpòt ki resipyan fre ak medya yo itilize ap tou afekte tan an li pran pou selil yo yo dwe nan eta optimal yo; Pi ba tanperati yo, pi long la li pran.
Si tout faktè sa yo chanje sou tan, yo pral ogmante tou variabilité ant eksperyans yo. Li nesesè pou minimize fluctuations tanperati sa yo, menm si li pa toujou posib pou kontwole tout bagay (sitou si plizyè moun ap itilize menm enkibatè a).
Ki jan pou misyon pou minimize varyasyon tanperati a epi redwi tan rekiperasyon tanperati a
Pa chofe medyòm lan
Gen kèk chèchè yo abitye ak pre-chofe boutèy antye nan medya nan yon beny dlo 37 ° C yo pote yo nan tanperati sa a anvan yo itilize. Li posib tou pou chofe medyòm lan nan yon enkibatè ki itilize sèlman pou prechofe mwayen epi yo pa pou kilti selil, kote medyòm lan ka rive jwenn yon tanperati optimal san yo pa twoublan kilti selil yo nan yon lòt enkibatè. Men, sa a, osi lwen ke nou konnen, se nòmalman pa yon depans abòdab.
Anndan enkibatè a
Louvri pòt la enkibatè tankou ti kòm posib epi fèmen li kòm byen vit. Evite tach frèt, ki kreye diferans tanperati nan enkibatè la. Kite espas ant boutèy yo pou pèmèt lè a sikile. Etajè yo andedan enkibatè a ka detache. Sa a pèmèt pou pi bon distribisyon chalè kòm li pèmèt lè pase nan twou yo. Sepandan, prezans nan twou ka mennen nan diferans ki genyen nan kwasans selil, paske gen yon diferans tanperati ant zòn nan ak twou ak zòn nan ak meta. Pou rezon sa yo, si eksperyans ou mande pou kwasans trè inifòm nan kilti a selil, ou ka mete kilti yo kilti sou sipò metal ak pi piti sifas kontak, ki yo anjeneral pa nesesè nan kilti selil woutin.
Minimize tan pwosesis selil
Pou minimize tan an depanse nan pwosesis tretman selil, ou bezwen
- ▶ òganize tout materyèl ak zouti ki nesesè yo anvan ou kòmanse travay.
- ▶ Travay byen vit ak fèt san pwoblèm, revize metòd eksperimantal davans pou operasyon ou vin repetitif ak otomatik.
- ▶ Minimize kontak likid ak lè anbyen.
- ▶ Kenbe yon tanperati konstan nan laboratwa kilti selil la kote w ap travay.
Post tan: Jan-03-2024