中文
Bagaimana cara memilih amplitudo pengocok yang benar?
Apa amplitudo pengocok?
Amplitudo pengocok adalah diameter palet dalam gerakan melingkar, kadang -kadang disebut simbol "diameter osilasi" atau "diameter lintasan": Ø. Radobio menawarkan shaker standar dengan amplitudo 3mm, 25mm, 26mm dan 50mm,. Shaker khusus dengan ukuran amplitudo lainnya juga tersedia.
Apa itu laju transfer oksigen (OTR)?
Laju transfer oksigen (OTR) adalah efisiensi oksigen ditransfer dari atmosfer ke cairan. Semakin tinggi nilai OTR berarti semakin tinggi efisiensi transfer oksigen.
Efek amplitudo dan kecepatan rotasi
Kedua faktor ini mempengaruhi pencampuran media dalam labu kultur. Semakin baik pencampuran, semakin baik laju transfer oksigen (OTR). Mengikuti pedoman ini, amplitudo dan kecepatan rotasi yang paling cocok dapat dipilih.
Secara umum, memilih amplitudo 25mm atau 26mm dapat digunakan sebagai amplitudo universal untuk semua aplikasi kultur.
Kultur bakteri, ragi dan jamur:
Transfer oksigen dalam labu goyang jauh lebih efisien daripada bioreaktor. Transfer oksigen mungkin menjadi faktor pembatas untuk kultur shake flask dalam banyak kasus. Amplitudo terkait dengan ukuran labu kerucut: Labu yang lebih besar menggunakan amplitudo yang lebih besar.
Rekomendasi: Amplitudo 25mm untuk labu kerucut dari 25ml hingga 2000ml.
Amplitudo 50 mm untuk labu kerucut dari 2000 mL hingga 5000 ml.
Kultur sel:
* Kultur sel mamalia memiliki kebutuhan oksigen yang relatif rendah.
* Untuk labu pengocok 250ml, pengiriman oksigen yang cukup dapat disediakan pada berbagai amplitudo dan kecepatan yang relatif luas (amplitudo 20-50mm; 100-300rpm).
* Untuk labu berdiameter yang lebih besar (labu Fernbach) amplitudo 50mm disarankan.
* Jika kantung kultur sekali pakai digunakan, amplitudo 50mm disarankan.
Piring mikrotiter dan sumur dalam:
Untuk pelat mikrotiter dan sumur dalam ada dua metode berbeda untuk mendapatkan transfer oksigen maksimum!
* Amplitudo 50 mm dengan kecepatan tidak kurang dari 250 rpm.
* Gunakan amplitudo 3mm pada 800-1000rpm.
Dalam banyak kasus, bahkan jika amplitudo yang masuk akal dipilih, itu mungkin tidak meningkatkan volume biokultur, karena peningkatan volume dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor. Misalnya, jika satu atau dua dari sepuluh faktor tidak ideal, maka peningkatan volume kultur akan terbatas tidak peduli seberapa baik faktor -faktor lain, atau dapat dikatakan bahwa pilihan amplitudo yang benar akan menghasilkan peningkatan yang nyata Dalam inkubator jika satu -satunya faktor pembatas untuk volume kultur adalah pengiriman oksigen. Misalnya, jika sumber karbon adalah faktor pembatas, tidak peduli seberapa baik transfer oksigen, volume kultur yang diinginkan tidak akan tercapai.
Kecepatan amplitudo dan rotasi
Baik amplitudo dan kecepatan rotasi dapat memiliki efek pada transfer oksigen. Jika kultur sel ditanam pada kecepatan rotasi yang sangat rendah (misalnya, 100 rpm), perbedaan amplitudo memiliki sedikit atau tidak ada efek nyata pada transfer oksigen. Untuk mencapai transfer oksigen tertinggi, langkah pertama adalah meningkatkan kecepatan rotasi sebanyak mungkin, dan baki akan seimbang dengan kecepatan dengan baik. Tidak semua sel dapat tumbuh dengan baik dengan osilasi kecepatan tinggi, dan beberapa sel yang sensitif terhadap gaya geser dapat mati karena kecepatan rotasi tinggi.
Pengaruh lainnya
Faktor -faktor lain dapat memiliki efek pada transfer oksigen:.
* Volume pengisian, labu kerucut harus diisi tidak lebih dari sepertiga dari total volume. Jika transfer oksigen maksimum harus dicapai, isi hingga tidak lebih dari 10%. Tidak pernah mengisi hingga 50%.
* Spoiler: Spoiler efektif dalam meningkatkan transfer oksigen di semua jenis kultur. Beberapa produsen merekomendasikan penggunaan labu "hasil ultra tinggi". Spoiler pada labu ini meningkatkan gesekan cair dan shaker mungkin tidak mencapai kecepatan set maksimum.
Korelasi antara amplitudo dan kecepatan
Gaya sentrifugal dalam pengocok dapat dihitung dengan menggunakan persamaan berikut
Fc = rpm2× amplitudo
Ada hubungan linier antara gaya sentrifugal dan amplitudo: jika Anda menggunakan amplitudo 25 mm ke amplitudo 50 mm (pada kecepatan yang sama), gaya sentrifugal meningkat dengan faktor 2.
Hubungan persegi ada antara gaya sentrifugal dan kecepatan rotasi.
Jika kecepatan meningkat dengan faktor 2 (amplitudo yang sama), gaya sentrifugal meningkat dengan faktor 4. Jika kecepatan meningkat dengan faktor 3, gaya sentrifugal meningkat dengan faktor 9!
Jika Anda menggunakan amplitudo 25 mm, inkubasi pada kecepatan yang diberikan. Jika Anda ingin mencapai gaya sentrifugal yang sama dengan amplitudo 50 mm, kecepatan rotasi harus dihitung sebagai akar kuadrat 1/2, jadi Anda harus menggunakan 70% dari kecepatan rotasi untuk mencapai kondisi inkubasi yang sama.
Harap dicatat bahwa di atas hanyalah metode teoritis untuk menghitung gaya sentrifugal. Ada faktor -faktor lain yang mempengaruhi dalam aplikasi nyata. Metode perhitungan ini memberikan nilai perkiraan untuk tujuan operasional.
Waktu pos: Sep-10-2023