中文
Kaip pasirinkti teisingą purtyklės amplitudę?
Kokia yra purtyklės amplitudė?
Kirtyklės amplitudė yra padėklo skersmuo apskrito judesio metu, kartais vadinamas „virpesių skersmeniu“ arba „takelio skersmeniu“ simbolis: Ø. „Radobio“ siūlo standartinius purtykles, kurių amplitudės yra 3 mm, 25 mm, 26 mm ir 50 mm. Taip pat yra pritaikytų purtyklių, kurių amplitudės dydis yra ir.
Kas yra deguonies perdavimo greitis (OTR)?
Deguonies perdavimo greitis (OTR) yra deguonies efektyvumas iš atmosferos į skystį. Kuo didesnė OTR vertė reiškia didesnį deguonies perdavimo efektyvumą.
Amplitudės ir sukimosi greičio poveikis
Abu šie veiksniai turi įtakos terpės maišymui kultūros kolboje. Kuo geriau maišyti, tuo geresnis deguonies perdavimo greitis (OTR). Laikantis šių gairių, galima pasirinkti tinkamiausią amplitudę ir sukimosi greitį.
Apskritai, pasirinkimas 25 mm arba 26 mm amplitudė gali būti naudojama kaip universali amplitudė visoms kultūros programoms.
Bakterijų, mielių ir grybelinių kultūrų:
Deguonies perdavimas purtymo kolbose yra daug mažiau efektyvus nei bioreaktoriuose. Deguonies perdavimas daugeliu atvejų gali būti ribojantis „Shake Flask“ kultūrų veiksnys. Amplitudė yra susijusi su kūginių kolbų dydžiu: didesnėse kolbose naudojamos didesnės amplitudės.
Rekomendacija: 25 mm amplitudė kūginėms kolboms nuo 25 ml iki 2000 ml.
50 mm amplitudė kūginėms kolboms nuo 2000 ml iki 5000 ml.
Ląstelių kultūra:
* Žinduolių ląstelių kultūroje yra palyginti mažai deguonies.
* Už 250 ml purtyklės kolbas galima tiekti pakankamai deguonies, palyginti su palyginti plačiu amplitudės ir greičio diapazonu (20–50 mm amplitudė; 100–300 aps / min).
* Jei norite didesnių skersmens kolbų (Fernbacho kolbos), rekomenduojama 50 mm amplitudė.
* Jei naudojami vienkartiniai kultūros maišeliai, rekomenduojama 50 mm amplitudė.
Mikrotitro ir giliai šluobių plokštelės:
Mikrotitro ir giliavandenių plokštelių metu yra du skirtingi metodai, skirti maksimaliai perduoti deguonį!
* 50 mm amplitudė ne mažesne kaip 250 aps / min greičiu.
* Naudokite 3 mm amplitudę esant 800–1000 aps / min.
Daugeliu atvejų, net jei pasirenkama pagrįsta amplitudė, ji gali nepadidinti biokultūros tūrio, nes tūrio padidėjimą gali turėti keli veiksniai. Pvz., Jei vienas ar du iš dešimties veiksnių nėra idealūs, tada kultūros tūrio padidėjimas bus ribotas, nesvarbu, kokie geri yra kiti veiksniai, arba galima teigti, kad teisingas amplitudės pasirinkimas pastebimai padidins padidėjimą Inkubatoriuje, jei vienintelis ribojantis kultūros tūrio veiksnys yra deguonies tiekimas. Pvz., Jei anglies šaltinis yra ribojantis veiksnys, nesvarbu, koks geras deguonies perdavimas, norimas kultūros tūris nebus pasiektas.
Amplitudė ir sukimosi greitis
Tiek amplitudė, tiek sukimosi greitis gali turėti įtakos deguonies perdavimui. Jei ląstelių kultūros auginamos labai mažu sukimosi greičiu (pvz., 100 aps / min), amplitudės skirtumai turi mažai pastebimo poveikio deguonies perdavimui arba jo visai nėra. Norint pasiekti didžiausią deguonies perkėlimą, pirmasis žingsnis yra kiek įmanoma padidinti sukimosi greitį, o dėklas bus tinkamai subalansuotas, kad greitis būtų tinkamai. Ne visos ląstelės gali gerai augti esant dideliems greičiams virpesiai, o kai kurios ląstelės, jautrios šlyties jėgoms, gali mirti nuo didelio sukimosi greičio.
Kitos įtakos
Kiti veiksniai gali turėti įtakos deguonies perdavimui :.
* Užpildymo tūris, kūginės kolbos turėtų būti užpildytos ne daugiau kaip trečdaliu viso tūrio. Jei reikia pasiekti maksimalų deguonies perdavimą, užpildykite ne daugiau kaip 10%. Niekada neužpildykite iki 50%.
* Spoileriai: Spoileriai veiksmingai gerina deguonies perdavimą visų rūšių kultūrose. Kai kurie gamintojai rekomenduoja naudoti „ypač didelio derlingumo“ kolbas. Šių kolbų spoileriai padidina skystą trintį, o purtyklė gali nepasiekti maksimalaus nustatyto greičio.
Koreliacija tarp amplitudės ir greičio
Išcentrinę purtyklės jėgą galima apskaičiuoti naudojant šią lygtį šioje lygtyje
FC = RPM2× amplitudė
Tarp išcentrinės jėgos ir amplitudės yra tiesinis ryšys: jei naudojate 25 mm amplitudę iki 50 mm amplitudės (tuo pačiu greičiu), išcentrinė jėga padidėja 2 koeficientu.
Tarp išcentrinės jėgos ir sukimosi greičio yra kvadratinis ryšys.
Jei greitis padidėja 2 koeficientu (tos pačios amplitudės), išcentrinė jėga padidėja 4 koeficientu. Jei greitis padidėja 3 koeficientu, išcentrinė jėga padidėja 9 koeficientu!
Jei naudojate 25 mm amplitudę, inkubuokite tam tikru greičiu. Jei norite pasiekti tą pačią išcentrinę jėgą, kurios amplitudė yra 50 mm, sukimosi greitis turėtų būti apskaičiuojamas kaip 1/2 kvadratinė šaknis, todėl norint pasiekti tas pačias inkubacijos sąlygas, turėtumėte naudoti 70% sukimosi greičio.
Atkreipkite dėmesį, kad aukščiau pateiktas teorinis išcentrinės jėgos apskaičiavimo metodas. Realiose programose yra ir kitų įtakos. Šis skaičiavimo metodas suteikia apytiksles vertes veiklos tikslais.
Pašto laikas: 2012 m. Rugsėjo 10 d