中文
Ефект на варијација на температурата врз културата на клетките
Температурата е важен параметар во културата на клетките затоа што влијае на репродуктивноста на резултатите. Температурните промени над или под 37 ° C имаат многу значаен ефект врз кинетиката на раст на клетките на клетките на цицачи, слична на онаа на бактериските клетки. Промени во изразувањето на генот и модификациите во клеточната структура, прогресијата на клеточниот циклус, стабилноста на mRNA може да се открие во клетките на цицачи по еден час на 32ºC. Покрај директно влијаат на растот на клетките, промените во температурата влијаат и на pH на медиумите, бидејќи растворливоста на CO2 ја менува pH вредноста (pH се зголемува на пониски температури). Култираните клетки на цицачи можат да толерираат значително намалување на температурата. Тие можат да се чуваат на 4 ° C за неколку дена и можат да толерираат замрзнување на -196 ° C (користејќи соодветни услови). Сепак, тие не можат да толерираат температури над околу 2 ° C над нормалното повеќе од неколку часа и ќе умрат брзо на 40 ° C и погоре. За да се обезбеди максимална репродуктивност на резултатите, дури и ако клетките преживеат, треба да се преземе грижа за да се одржи температурата што е можно повеќе константна за време на инкубацијата и ракувањето на клетките надвор од инкубаторот.
Причини за варијации на температурата во инкубаторот
Willе забележите дека кога ќе се отвори вратата на инкубаторот, температурата брзо се спушта кон утврдената вредност од 37 ° C. Во принцип, температурата ќе се опорави во рок од неколку минути по затворањето на вратата. Всушност, на статичките култури им треба време да се опорават на поставената температура во инкубаторот. Голем број фактори можат да влијаат на времето што е потребно за клеточна култура да ја врати температурата по третманот надвор од инкубаторот. Овие фактори вклучуваат
- ▶ Должината на времето кога клетките се надвор од инкубаторот
- ▶ Вид на колба во која се одгледуваат клетките (геометријата влијае на преносот на топлина)
- ▶ Број на контејнери во инкубаторот.
- ▶ Директен контакт на колбите со челична полица влијае на размената на топлина и брзината на достигнување на оптимална температура, па затоа е подобро да се избегнат магацини со колби и да се постави секој сад
- ▶ Директно на полицата на инкубаторот.
Првичната температура на какви било свежи контејнери и користени медиуми, исто така, ќе влијае на времето што е потребно за ќелиите да бидат во нивната оптимална состојба; Колку е пониска нивната температура, толку подолго е потребно.
Ако сите овие фактори се променат со текот на времето, тие исто така ќе ја зголемат варијабилноста помеѓу експериментите. Неопходно е да се минимизираат овие температурни флуктуации, дури и ако не е секогаш можно да се контролира сè (особено ако неколку луѓе користат ист инкубатор).
Како да се минимизираат варијациите на температурата и да се намали времето за закрепнување на температурата
Со загревање на медиумот
Некои истражувачи се навикнати да пред затоплуваат цели шишиња медиуми во водена бања од 37 ° C за да ги доведат на оваа температура пред употреба. Исто така е можно да се загрее медиумот во инкубатор што се користи само за средно загревање, а не за клеточна култура, каде медиумот може да достигне оптимална температура без да ги наруши клеточните култури во друг инкубатор. Но, ова, колку што знаеме, обично не е прифатлив трошок.
Внатре во инкубаторот
Отворете ја вратата на инкубаторот што е можно помалку и затворете ја што е можно побрзо. Избегнувајте ладни дамки, кои создаваат температурни разлики во инкубаторот. Оставете простор помеѓу колбите за да се овозможи да циркулира воздухот. Полиците во инкубаторот можат да бидат перфорирани. Ова овозможува подобра дистрибуција на топлина бидејќи овозможува воздухот да помине низ дупките. Сепак, присуството на дупки може да доведе до разлики во растот на клетките, бидејќи постои температурна разлика помеѓу областа со дупки и областа со мета. Од овие причини, ако вашите експерименти бараат многу униформа раст на клеточната култура, можете да ги поставите колбите за култура на метални потпори со помали контактни површини, кои обично не се неопходни во рутинската култура на клетките.
Минимизирање на времето за обработка на клетките
За да го минимизирате времето за време на времето во процесот на третман на клетки, треба
- ▶ Организирајте ги сите потребни материјали и алатки пред да започнете да работите.
- ▶ Работете брзо и непречено, разгледувајќи ги експерименталните методи однапред, така што вашите операции ќе станат повторливи и автоматизирани.
- ▶ Минимизирајте контакт со течности со амбиентален воздух.
- ▶ Одржувајте постојана температура во лабораторијата за клеточна култура каде што работите.
Време на објавување: Јануари-03-2024