Како да ја изберете вистинската амплитуда на шејкерот?
Колкава е амплитудата на шејкерот?
Амплитудата на тресерот е дијаметарот на палетата во кружно движење, понекогаш наречен симбол за „дијаметар на осцилација“ или „дијаметар на шина“: Ø. Radobio нуди стандардни тресери со амплитуди од 3 mm, 25 mm, 26 mm и 50 mm. Достапни се и прилагодени тресери со други големини на амплитудата.
Што е брзина на пренос на кислород (OTR)?
Стапката на пренос на кислород (OTR) е ефикасноста на пренос на кислород од атмосферата во течноста. Колку е поголема вредноста на OTR, толку е поголема ефикасноста на пренос на кислород.
Ефект на амплитудата и брзината на ротација
И двата фактори влијаат врз мешањето на медиумот во колбата за култура. Колку е подобро мешањето, толку е подобра брзината на пренос на кислород (OTR). Следејќи ги овие упатства, може да се избере најсоодветната амплитуда и брзина на ротација.
Општо земено, изборот на амплитуда од 25 mm или 26 mm може да се користи како универзална амплитуда за сите апликации во културата.
Бактериски, квасни и габични култури:
Преносот на кислород во колби со протресување е многу помалку ефикасен отколку во биореактори. Преносот на кислород може да биде ограничувачки фактор за културите во колби со протресување во повеќето случаи. Амплитудата е поврзана со големината на конусните колби: поголемите колби користат поголеми амплитуди.
Препорака: амплитуда од 25 mm за конусни колби од 25 ml до 2000 ml.
Амплитуда од 50 mm за конусни колби од 2000 ml до 5000 ml.
Клеточна култура:
* Културите на клетките кај цицачите имаат релативно ниска потреба од кислород.
* За колби со тресење од 250 мл, може да се обезбеди доволна испорака на кислород во релативно широк опсег на амплитуди и брзини (амплидула од 20-50 мм; 100-300 вртежи во минута).
* За колби со поголем дијаметар (колби Фернбах) се препорачува амплитуда од 50 mm.
* Доколку се користат кеси за култури за еднократна употреба, се препорачува амплитуда од 50 mm.
Микротитер и плочи со длабоки бунари:
За микротитер и плочи со длабок бунар, постојат два различни методи за да се добие максимален трансфер на кислород!
* Амплитуда од 50 mm со брзина од најмалку 250 вртежи во минута.
* Користете амплитуда од 3 mm при 800-1000 вртежи во минута.
Во многу случаи, дури и ако се избере разумна амплитуда, таа може да не го зголеми волуменот на биокултурата, бидејќи зголемувањето на волуменот може да биде под влијание на неколку фактори. На пример, ако еден или два од десетте фактори не се идеални, тогаш зголемувањето на волуменот на културата ќе биде ограничено без разлика колку се добри другите фактори, или може да се тврди дека правилниот избор на амплитуда ќе резултира со забележително зголемување на инкубаторот ако единствениот ограничувачки фактор за волуменот на културата е испораката на кислород. На пример, ако изворот на јаглерод е ограничувачкиот фактор, без разлика колку е добар преносот на кислород, посакуваниот волумен на културата нема да се постигне.
Амплитуда и брзина на ротација
И амплитудата и брзината на ротација можат да имаат влијание врз преносот на кислород. Ако клеточните култури се одгледуваат со многу ниски ротациони брзини (на пр., 100 вртежи во минута), разликите во амплитудата имаат мал или никаков забележлив ефект врз преносот на кислород. За да се постигне највисок пренос на кислород, првиот чекор е да се зголеми брзината на ротација колку што е можно повеќе, а послужавникот ќе биде правилно избалансиран за брзина. Не сите клетки можат да растат добро со осцилации со голема брзина, а некои клетки кои се чувствителни на сили на смолкнување може да умрат од високи ротациони брзини.
Други влијанија
Други фактори можат да влијаат врз преносот на кислород:
* Волумен на полнење, конусните колби треба да се полнат не повеќе од една третина од вкупниот волумен. Доколку треба да се постигне максимален пренос на кислород, наполнете не повеќе од 10%. Никогаш не полнете до 50%.
* Спојлери: Спојлерите се ефикасни во подобрувањето на преносот на кислород кај сите видови култури. Некои производители препорачуваат употреба на колби со „ултра висок принос“. Спојлерите на овие колби го зголемуваат триењето на течноста и трескачот може да не ја достигне максималната зададена брзина.
Корелација помеѓу амплитудата и брзината
Центрифугалната сила во тресерот може да се пресмета со помош на следната равенка
FC = вртежи во минута2× амплитуда
Постои линеарна врска помеѓу центрифугалната сила и амплитудата: ако користите амплитуда од 25 mm до амплитуда од 50 mm (со иста брзина), центрифугалната сила се зголемува за двојно.
Постои квадратна врска помеѓу центрифугалната сила и брзината на ротација.
Ако брзината се зголеми за фактор 2 (иста амплитуда), центрифугалната сила се зголемува за фактор 4. Ако брзината се зголеми за фактор 3, центрифугалната сила се зголемува за фактор 9!
Ако користите амплитуда од 25 mm, инкубирајте со дадена брзина. Ако сакате да постигнете иста центрифугална сила со амплитуда од 50 mm, брзината на ротација треба да се пресмета како квадратен корен од 1/2, па затоа треба да користите 70% од брзината на ротација за да ги постигнете истите услови на инкубација.
Ве молиме имајте предвид дека горенаведеното е само теоретски метод за пресметување на центрифугалната сила. Постојат и други фактори на влијание во реалните примени. Овој метод на пресметување дава приближни вредности за оперативни цели.
Време на објавување: 03 јануари 2024 година