सेल संस्कृतीवर तापमान भिन्नतेचा प्रभाव
तापमान हे सेल संस्कृतीत एक महत्त्वपूर्ण मापदंड आहे कारण त्याचा परिणाम परिणामांच्या पुनरुत्पादकतेवर होतो. 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात किंवा त्यापेक्षा कमी तापमानातील बदलांचा बॅक्टेरियाच्या पेशींप्रमाणेच स्तनपायी पेशींच्या पेशींच्या वाढीच्या गतिजांवर खूप महत्त्वपूर्ण परिणाम होतो. Changes in gene expression and modifications in cellular structure, cell cycle progression, mRNA stability can be detected in mammalian cells after one hour at 32ºC. In addition to directly affecting cell growth, changes in temperature also affect the pH of the media, as the solubility of CO2 alters the pH (pH increases at lower temperatures). सुसंस्कृत स्तनपायी पेशी लक्षणीय तापमान कमी होण्यास सहन करू शकतात. ते कित्येक दिवस 4 डिग्री सेल्सिअस तापमानात साठवले जाऊ शकतात आणि अतिशीत -196 डिग्री सेल्सियस पर्यंत (योग्य परिस्थितीचा वापर करून) सहन करू शकतात. तथापि, ते काही तासांपेक्षा जास्त काळापेक्षा जास्त 2 डिग्री सेल्सियसपेक्षा जास्त तापमान सहन करू शकत नाहीत आणि 40 डिग्री सेल्सियस आणि त्यापेक्षा जास्त वेगाने लवकर मरतील. To ensure maximum reproducibility of results, even if the cells survive, care needs to be taken to maintain the temperature as constant as possible during the incubation and handling of the cells outside the incubator.
इनक्यूबेटरमध्ये तापमानात बदल होण्याची कारणे
आपल्या लक्षात येईल की जेव्हा इनक्यूबेटर दरवाजा उघडला जातो तेव्हा तापमान 37 डिग्री सेल्सियसच्या सेट मूल्यावर वेगाने खाली येते. सर्वसाधारणपणे, दरवाजा बंद झाल्यानंतर काही मिनिटांच्या आत तापमान बरे होईल. खरं तर, इनक्यूबेटरमधील सेट तापमानात पुनर्प्राप्त करण्यासाठी स्थिर संस्कृतींना वेळ आवश्यक आहे. इनक्यूबेटरच्या बाहेर उपचारानंतर तापमान परत मिळविण्यासाठी सेल संस्कृतीत लागणार्या वेळेस बर्याच घटकांवर परिणाम होऊ शकतो.या घटकांमध्ये समाविष्ट आहे
- Cells पेशी उष्मायनाच्या बाहेर किती वेळ बाहेर पडली आहेत
- Lask ज्या प्रकारचे पेशी घेतले जातात त्या फ्लास्कचा प्रकार (भूमिती उष्णता हस्तांतरणावर परिणाम करते)
- Inc इनक्यूबेटरमध्ये कंटेनरची संख्या.
- The थेट इनक्यूबेटरच्या शेल्फवर.
वापरल्या गेलेल्या कोणत्याही ताज्या कंटेनर आणि मीडियाचे प्रारंभिक तापमान देखील पेशी त्यांच्या इष्टतम स्थितीत येण्यास लागणार्या वेळेवर परिणाम करेल; त्यांचे तापमान जितके कमी असेल तितके जास्त.
जर हे सर्व घटक कालांतराने बदलले तर ते प्रयोगांमधील परिवर्तनशीलता देखील वाढवतील. It is necessary to minimize these temperature fluctuations, even if it is not always possible to control everything (especially if several people are using the same incubator).
तापमानातील भिन्नता कमी कशी करावी आणि तापमान पुनर्प्राप्ती वेळ कमी कसे करावे
माध्यम प्रीहेट करून
काही संशोधकांचा वापर करण्यापूर्वी या तापमानात आणण्यासाठी ° 37 डिग्री सेल्सियस वॉटर बाथमध्ये मीडियाच्या संपूर्ण बाटल्या प्री-वार्मिंगची सवय आहे. It is also possible to preheat the medium in an incubator that is only used for medium preheating and not for cell culture, where the medium can reach an optimal temperature without disturbing the cell cultures in another incubator. परंतु हे, आपल्या माहितीनुसार हे सहसा परवडणारे खर्च नसते.
इनक्यूबेटरच्या आत
शक्य तितक्या कमी इनक्यूबेटरचा दरवाजा उघडा आणि द्रुतपणे बंद करा. थंड स्पॉट्स टाळा, जे इनक्यूबेटरमध्ये तापमानात फरक निर्माण करतात. हवा फिरण्यास अनुमती देण्यासाठी फ्लास्क दरम्यान जागा सोडा. इनक्यूबेटरच्या आत शेल्फ छिद्रित केले जाऊ शकते. हे उष्णता वितरणास चांगल्या प्रकारे अनुमती देते कारण यामुळे हवेतून हवा जाण्याची परवानगी मिळते. However, the presence of holes can lead to differences in cell growth, because there is a temperature difference between the area with holes and the area with meta. For these reasons, if your experiments require highly uniform growth of the cell culture, you can place the culture flasks on metal supports with smaller contact surfaces, which are usually not necessary in routine cell culture.
सेल प्रक्रिया वेळ कमी करणे
सेल ट्रीटमेंट प्रक्रियेतील वेळ कमी करण्यासाठी, आपल्याला आवश्यक आहे
- Working आपण कार्य सुरू करण्यापूर्वी सर्व आवश्यक सामग्री आणि साधने आयोजित करा.
- ▶ द्रुतपणे आणि सहजतेने कार्य करा, प्रायोगिक पद्धतींचा आगाऊ पुनरावलोकन करा जेणेकरून आपले ऑपरेशन्स पुनरावृत्ती आणि स्वयंचलित होतील.
- Em सभोवतालच्या हवेसह पातळ पदार्थांचा संपर्क कमी करा.
- Sell आपण जिथे काम करता त्या सेल कल्चर लॅबमध्ये स्थिर तापमान ठेवा.
पोस्ट वेळ: ऑगस्ट -28-2023