中文
Kesan variasi suhu pada budaya sel
Suhu adalah parameter penting dalam budaya sel kerana ia mempengaruhi kebolehulangan hasil. Perubahan suhu di atas atau di bawah 37 ° C mempunyai kesan yang sangat signifikan terhadap kinetika pertumbuhan sel sel mamalia, sama dengan sel -sel bakteria. Perubahan dalam ekspresi gen dan pengubahsuaian dalam struktur selular, perkembangan kitaran sel, kestabilan mRNA dapat dikesan dalam sel mamalia selepas satu jam pada 32ºC. Sebagai tambahan kepada pertumbuhan sel secara langsung, perubahan suhu juga menjejaskan pH media, kerana kelarutan CO2 mengubah pH (pH meningkat pada suhu yang lebih rendah). Sel -sel mamalia yang berbudaya boleh bertolak ansur dengan penurunan suhu yang ketara. Mereka boleh disimpan pada suhu 4 ° C selama beberapa hari dan boleh bertolak ansur dengan pembekuan hingga -196 ° C (menggunakan keadaan yang sesuai). Walau bagaimanapun, mereka tidak boleh mentolerir suhu di atas kira -kira 2 ° C di atas normal selama lebih dari beberapa jam dan akan mati dengan cepat pada 40 ° C dan ke atas. Untuk memastikan kebolehulangan hasil maksimum, walaupun sel -sel bertahan, penjagaan perlu diambil untuk mengekalkan suhu sebagai malar yang mungkin semasa inkubasi dan pengendalian sel -sel di luar inkubator.
Sebab variasi suhu di dalam inkubator
Anda akan menyedari bahawa apabila pintu inkubator dibuka, suhu jatuh dengan cepat ke nilai set 37 ° C. Secara umum, suhu akan pulih dalam masa beberapa minit selepas pintu ditutup. Malah, budaya statik memerlukan masa untuk pulih ke suhu yang ditetapkan dalam inkubator. Beberapa faktor boleh menjejaskan masa yang diperlukan untuk budaya sel untuk mendapatkan semula suhu selepas rawatan di luar inkubator. Faktor -faktor ini termasuk:
- ▶ Tempoh masa sel telah keluar dari inkubator
- ▶ Jenis kelalang di mana sel -sel ditanam (geometri mempengaruhi pemindahan haba)
- ▶ Bilangan bekas dalam inkubator.
- ▶ Perhubungan langsung dari Flasks dengan rak keluli mempengaruhi pertukaran haba dan kelajuan mencapai suhu yang optimum, jadi lebih baik untuk mengelakkan susunan kikat dan meletakkan setiap kapal
- ▶ Secara langsung di rak inkubator.
Suhu awal mana -mana bekas segar dan media yang digunakan juga akan menjejaskan masa yang diperlukan untuk sel -sel berada di keadaan optimum mereka; Semakin rendah suhu mereka, semakin lama diperlukan.
Jika semua faktor ini berubah dari masa ke masa, mereka juga akan meningkatkan kebolehubahan antara eksperimen. Adalah perlu untuk meminimumkan turun naik suhu ini, walaupun tidak selalu mungkin untuk mengawal segala -galanya (terutamanya jika beberapa orang menggunakan inkubator yang sama).
Cara meminimumkan variasi suhu dan mengurangkan masa pemulihan suhu
Dengan memanaskan medium
Sesetengah penyelidik terbiasa dengan botol media pra-pemanasan dalam mandi air 37 ° C untuk membawa mereka ke suhu ini sebelum digunakan. Ia juga mungkin untuk memanaskan medium dalam inkubator yang hanya digunakan untuk pemanasan sederhana dan bukan untuk budaya sel, di mana medium dapat mencapai suhu yang optimum tanpa mengganggu budaya sel dalam inkubator lain. Tetapi ini, sejauh yang kita tahu, biasanya bukan perbelanjaan yang berpatutan.
Di dalam inkubator
Buka pintu inkubator sesedikit mungkin dan tutupnya dengan cepat. Elakkan bintik -bintik sejuk, yang menghasilkan perbezaan suhu dalam inkubator. Tinggalkan ruang di antara potongan -potongan untuk membolehkan udara beredar. Rak di dalam inkubator boleh berlubang. Ini membolehkan pengedaran haba yang lebih baik kerana ia membolehkan udara melewati lubang. Walau bagaimanapun, kehadiran lubang boleh membawa kepada perbezaan dalam pertumbuhan sel, kerana terdapat perbezaan suhu antara kawasan dengan lubang dan kawasan dengan meta. Atas sebab -sebab ini, jika eksperimen anda memerlukan pertumbuhan yang sangat seragam dari budaya sel, anda boleh meletakkan clask budaya pada sokongan logam dengan permukaan sentuhan yang lebih kecil, yang biasanya tidak diperlukan dalam budaya sel rutin.
Meminimumkan masa pemprosesan sel
Untuk meminimumkan masa menghabiskan masa dalam proses rawatan sel, anda perlu
- ▶ mengatur semua bahan dan alat yang diperlukan sebelum anda mula bekerja.
- ▶ Bekerja dengan cepat dan lancar, mengkaji semula kaedah eksperimen terlebih dahulu supaya operasi anda menjadi berulang dan automatik.
- ▶ Kurangkan hubungan cecair dengan udara ambien.
- ▶ Mengekalkan suhu malar dalam makmal kultur sel di mana anda bekerja.
Masa Post: Jan-03-2024