中文
Effett tal-varjazzjoni tat-temperatura fuq il-kultura taċ-ċelluli
It-temperatura hija parametru importanti fil-kultura taċ-ċelluli minħabba li taffettwa r-riproduċibilità tar-riżultati. Il-bidliet fit-temperatura 'l fuq jew taħt is-37 ° C għandhom effett sinifikanti ħafna fuq il-kinetika tat-tkabbir taċ-ċellula taċ-ċelloli mammiferi, simili għal dik taċ-ċelloli tal-batterja. Bidliet fl-espressjoni tal-ġene u modifiki fl-istruttura ċellulari, progressjoni taċ-ċiklu taċ-ċellula, stabbiltà tal-mRNA tista 'tiġi skoperta fiċ-ċelloli mammiferi wara siegħa f'32ºC. Minbarra li taffettwa direttament it-tkabbir taċ-ċelluli, il-bidliet fit-temperatura jaffettwaw ukoll il-pH tal-midja, billi s-solubilità tas-CO2 tibdel il-pH (il-pH tiżdied f'temperaturi aktar baxxi). Ċelloli tal-mammiferi kkultivati jistgħu jittolleraw tnaqqis sinifikanti fit-temperatura. Jistgħu jinħażnu f'4 ° C għal diversi jiem u jistgħu jittolleraw l-iffriżar għal -196 ° C (bl-użu ta 'kundizzjonijiet xierqa). Madankollu, ma jistgħux jittolleraw temperaturi 'l fuq minn madwar 2 ° C' il fuq min-normal għal aktar minn ftit sigħat u se jmutu malajr f'40 ° C u 'l fuq. Sabiex tkun żgurata riproduċibilità massima tar-riżultati, anke jekk iċ-ċelloli jibqgħu ħajjin, għandha tingħata attenzjoni biex tinżamm it-temperatura kemm jista 'jkun kostanti waqt l-inkubazzjoni u l-immaniġġjar taċ-ċelloli barra l-inkubatur.
Raġunijiet għal varjazzjonijiet tat-temperatura ġewwa l-inkubatur
Inti ndunat li meta l-bieb tal-inkubatur jinfetaħ, it-temperatura tinżel malajr għall-valur stabbilit ta '37 ° C. B'mod ġenerali, it-temperatura tirkupra fi ftit minuti wara li l-bieb jingħalaq. Fil-fatt, il-kulturi statiċi għandhom bżonn ħin biex jirkupraw għat-temperatura stabbilita fl-inkubatur. Numru ta 'fatturi jistgħu jaffettwaw il-ħin li tieħu għal kultura taċ-ċellula biex terġa' tikseb it-temperatura wara t-trattament barra l-inkubatur. Dawn il-fatturi jinkludu ：
- ▶ It-tul ta 'żmien iċ-ċelloli ilhom barra mill-inkubatur
- ▶ It-tip ta 'flask li fih huma mkabbra ċ-ċelloli (il-ġeometrija taffettwa t-trasferiment tas-sħana)
- ▶ Numru ta 'kontenituri fl-inkubatur.
- ▶ Il-kuntatt dirett tal-fliexken mal-ixkaffa tal-azzar jaffettwa l-iskambju tas-sħana u l-veloċità li tilħaq it-temperatura ottimali, u għalhekk huwa aħjar li tevita munzelli ta 'fliexken u li tpoġġi kull bastiment
- ▶ Direttament fuq l-ixkaffa ta 'l-inkubatur.
It-temperatura inizjali ta 'kwalunkwe kontenitur frisk u medja użata se taffettwa wkoll il-ħin li tieħu biex iċ-ċelloli jkunu fl-istat ottimali tagħhom; Iktar ma tkun baxxa t-temperatura tagħhom, iktar ma tieħu.
Jekk dawn il-fatturi kollha jinbidlu maż-żmien, huma jżidu wkoll il-varjabbiltà bejn l-esperimenti. Huwa meħtieġ li jiġu minimizzati dawn il-varjazzjonijiet fit-temperatura, anke jekk mhux dejjem ikun possibbli li jiġi kkontrollat kollox (speċjalment jekk diversi nies qed jużaw l-istess inkubatur).
Kif timminimizza l-varjazzjonijiet tat-temperatura u tnaqqas il-ħin tal-irkupru tat-temperatura
Billi tissaħħan minn qabel il-mezz
Xi riċerkaturi huma mdorrijin li jsajru fliexken sħaħ ta 'midja f'banju tal-ilma ta' 37 ° C biex iwassluhom għal din it-temperatura qabel l-użu. Huwa wkoll possibbli li tissaħħan minn qabel il-mezz f'inkubatur li jintuża biss għal tisħin minn qabel medju u mhux għall-kultura taċ-ċelluli, fejn il-mezz jista 'jilħaq temperatura ottimali mingħajr ma jfixkel il-kulturi taċ-ċelluli f'inkubatur ieħor. Iżda dan, sa fejn nafu, normalment ma jkunx spiża bi prezz raġonevoli.
Ġewwa l-inkubatur
Iftaħ il-bieb tal-inkubatur mill-inqas possibbli u għalaqha malajr. Evita tikek kesħin, li joħolqu differenzi fit-temperatura fl-inkubatur. Ħalli l-ispazju bejn il-fliexken biex tippermetti li l-arja tiċċirkola. L-ixkafef ġewwa l-inkubatur jistgħu jiġu mtaqqba. Dan jippermetti distribuzzjoni tas-sħana aħjar peress li tippermetti li l-arja tgħaddi mit-toqob. Madankollu, il-preżenza ta 'toqob tista' twassal għal differenzi fit-tkabbir taċ-ċelluli, minħabba li hemm differenza fit-temperatura bejn iż-żona bit-toqob u ż-żona b'meta. Għal dawn ir-raġunijiet, jekk l-esperimenti tiegħek jeħtieġu tkabbir uniformi ħafna tal-kultura taċ-ċellula, tista 'tpoġġi l-fliexken tal-kultura fuq appoġġ tal-metall b'uċuħ ta' kuntatt iżgħar, li ġeneralment mhumiex meħtieġa fil-kultura taċ-ċelluli ta 'rutina.
Imminimizza l-ħin tal-ipproċessar taċ-ċelloli
Biex timminimizza l-ħin li tqatta 'fil-proċess ta' trattament taċ-ċelloli, għandek bżonn
- ▶ Organizza l-materjali u l-għodda kollha meħtieġa qabel tibda taħdem.
- ▶ Aħdem malajr u bla xkiel, billi tirrevedi metodi sperimentali bil-quddiem sabiex l-operazzjonijiet tiegħek isiru ripetittivi u awtomatizzati.
- ▶ Imminimizza l-kuntatt ta 'likwidi bl-arja ambjentali.
- ▶ Żomm temperatura kostanti fil-laboratorju tal-kultura taċ-ċellula fejn taħdem.
Ħin ta 'wara: Jan-03-2024