中文
Jak wybrać odpowiednią amplitudę shakera?
Jaka jest amplituda shakera?
Amplituda wytrząsarki to średnica palety w ruchu okrągłym, czasem nazywanym symbolem „średnicy oscylacji” lub „średnicy ścieżki”: Ø. Radobio oferuje standardowe wytrząsarki z amplitudami 3 mm, 25 mm, 26 mm i 50 mm. Dostępne są również niestandardowe shakery o innych rozmiarach amplitudy.
Co to jest szybkość transferu tlenu (OTR)?
Szybkość transferu tlenu (OTR) to wydajność tlenu jest przenoszona z atmosfery do cieczy. Im wyższa wartość OTR oznacza wyższą wydajność transferu tlenu.
Wpływ amplitudy i prędkości obrotowej
Oba te czynniki wpływają na mieszanie pożywki w kolbie hodowli. Im lepsze mieszanie, tym lepsza szybkość transferu tlenu (OTR). Zgodnie z tymi wytycznymi można wybrać najbardziej odpowiednią amplitudę i prędkość obrotową.
Ogólnie rzecz biorąc, wybór amplitudy 25 mm lub 26 mm może być stosowany jako uniwersalna amplituda dla wszystkich zastosowań kultury.
Kultury bakteryjne, drożdży i grzybowe:
Przenoszenie tlenu w kolbach wstrząsających jest znacznie mniej wydajne niż w bioreaktorach. W większości przypadków przenoszenie tlenu może być czynnikiem ograniczającym kultury shake. Amplituda jest związana z wielkością stożkowych kolb: większe kolby używają większych amplitud.
Zalecenie: amplituda 25 mm dla stożkowych kolb od 25 ml do 2000 ml.
Amplituda 50 mm dla kolb stożkowych od 2000 ml do 5000 ml.
Kultura komórkowa:
* Hodowla komórek ssaków ma stosunkowo niski zapotrzebowanie na tlen.
* Dla 250 ml kolb shakera można zapewnić wystarczające dostarczanie tlenu w stosunkowo szerokim zakresie amplitud i prędkości (amplituda 20-50 mm; 100–300 obr / min).
* W przypadku kolb o większej średnicy (kolby Fernbacha) Zaleca się amplitudę 50 mm.
* Jeśli stosowane są torby do użycia jednorazowej, zaleca się amplitudę 50 mm.
Płytki mikrotiterowe i głębokie:
W przypadku płyt mikrotiterowych i głębinowych istnieją dwie różne metody uzyskania maksymalnego transferu tlenu!
* Amplituda 50 mm z prędkością nie mniejszą niż 250 obr / min.
* Użyj amplitudy 3 mm przy 800-1000 obr / min.
W wielu przypadkach, nawet jeśli wybrana jest rozsądna amplituda, może nie zwiększyć objętości biokultury, ponieważ na wzrost objętości może mieć wpływ kilka czynników. Na przykład, jeśli jeden lub dwa z dziesięciu czynników nie są idealne, wzrost objętości hodowli będzie ograniczony bez względu na to, jak dobre są inne czynniki, lub można argumentować, że prawidłowy wybór amplitudy spowoduje zauważalny wzrost W inkubatorze, jeśli jedynym czynnikiem ograniczającym objętość hodowli jest dostarczanie tlenu. Na przykład, jeśli źródło węgla jest czynnikiem ograniczającym, bez względu na to, jak dobry jest transfer tlenu, pożądana objętość hodowli nie zostanie osiągnięta.
Amplituda i prędkość obrotowa
Zarówno amplituda, jak i prędkość obrotowa mogą mieć wpływ na transfer tlenu. Jeśli hodowle komórkowe są hodowane przy bardzo niskich prędkościach obrotowych (np. 100 rpm), różnice w amplitudzie mają niewielki lub bez zauważalny wpływ na przenoszenie tlenu. Aby osiągnąć najwyższy transfer tlenu, pierwszym krokiem jest jak najwięcej zwiększenia prędkości obrotowej, a taca będzie odpowiednio zrównoważona dla prędkości. Nie wszystkie komórki mogą dobrze rosnąć z oscylacjami o dużej prędkości, a niektóre komórki wrażliwe na siły ścinające mogą umrzeć z powodu wysokich prędkości obrotowych.
Inne wpływy
Inne czynniki mogą mieć wpływ na transfer tlenu:.
* Objętość wypełniania, stożkowe kolby nie powinny być wypełnione do nie więcej niż jednej trzeciej całkowitej objętości. Jeśli ma zostać osiągnięte maksymalne transfer tlenu, wypełnij nie więcej niż 10%. Nigdy nie wypełniaj do 50%.
* Spoilery: spoilery skutecznie poprawia transfer tlenu we wszystkich rodzajach kultur. Niektórzy producenci zalecają stosowanie kolb „ultra wysokiej wydajności”. Spoilery na tych kolbach zwiększają cierne tarcie, a shaker może nie osiągnąć maksymalnej ustalonej prędkości.
Korelacja między amplitudą a prędkością
Siła odśrodkowa w wytrząsarce można obliczyć za pomocą następującego równania
Fc = rpm2× Amplituda
Istnieje liniowa zależność między siłą odśrodkową a amplituą: jeśli używasz amplitudy 25 mm do amplitudy 50 mm (przy tej samej prędkości), siła odśrodkowa wzrasta o współczynnik 2.
Istnieje związek kwadratowy między siłą odśrodkową a prędkością obrotową.
Jeśli prędkość wzrośnie o współczynnik 2 (sama amplituda), siła odśrodkowa wzrasta o współczynnik 4. Jeśli prędkość wzrośnie o współczynnik 3, siła odśrodkowa wzrasta o współczynnik 9!
Jeśli używasz amplitudy 25 mm, inkubuj z daną prędkością. Jeśli chcesz osiągnąć tę samą siłę odśrodkową o amplitudzie 50 mm, prędkość obrotową należy obliczyć jako pierwiastek kwadratowy 1/2, więc powinieneś użyć 70% prędkości obrotowej, aby osiągnąć te same warunki inkubacji.
Należy pamiętać, że powyższe jest tylko teoretyczną metodą obliczania siły odśrodkowej. Istnieją inne czynniki wpływające w rzeczywistych zastosowaniach. Ta metoda obliczeń daje przybliżone wartości do celów operacyjnych.
Czas po: 03-2024