中文
Как выбрать правильную амплитуду шейкера?
Какова амплитуда шейкера?
Амплитуда шейкера - это диаметр поддона в круговом движении, который иногда называется символом «диаметра колебаний» или «диаметра дорожки»: Ø. Radobio предлагает стандартные шейкеры с амплитудами 3 мм, 25 мм, 26 мм и 50 мм. Также доступны индивидуальные шейкеры с другими размерами амплитуды.
Что такое скорость переноса кислорода (OTR)?
Скорость переноса кислорода (OTR) - это эффективность кислорода переносится из атмосферы в жидкость. Чем выше значение OTR означает, что тем выше эффективность переноса кислорода.
Влияние амплитуды и скорости вращения
Оба этих фактора влияют на смешение среды в культурной колбе. Чем лучше смешивание, тем лучше скорость переноса кислорода (OTR). Следуя этим рекомендациям, можно выбрать наиболее подходящую амплитуду и скорость вращения.
В целом, выбор амплитуды 25 мм или 26 мм может использоваться в качестве универсальной амплитуды для всех приложений для культуры.
Бактериальные, дрожжи и грибковые культуры:
Передача кислорода в коктейльных колбах гораздо менее эффективен, чем в биореакторах. Перенос кислорода может быть ограничивающим фактором для культур Shake Flask в большинстве случаев. Амплитуда связана с размером конических колб: большие колбы используют большие амплитуды.
Рекомендация: амплитуда 25 мм для конических колб с 25 мл до 2000 мл.
Амплитуда 50 мм для конических вспышек от 2000 мл до 5000 мл.
Клеточная культура:
* Клеточная культура млекопитающих имеет относительно низкую потребность в кислороде.
* Для совокуплений шейкеров 250 мл можно обеспечить достаточную доставку кислорода в относительно широком диапазоне амплитуд и скоростей (амплитуда 20-50 мм; 100-300 об / мин).
* Для колбах большего диаметра (колышки Фернбаха) рекомендуется амплитуда 50 мм.
* Если используются одноразовые сумки для культуры, рекомендуется амплитуда 50 мм.
Микротит
Для микротитров и глубокоулистых пластин существует два разных метода для получения максимального переноса кислорода!
* 50 мм амплитуда со скоростью не менее 250 об / мин.
* Используйте амплитуду 3 мм при 800-1000 об / мин.
Во многих случаях, даже если выбрана разумная амплитуда, она может не увеличить объем биокультуры, поскольку на увеличение объема может влиять несколько факторов. Например, если один или два из десяти факторов не являются идеальными, то увеличение объема культуры будет ограничено независимо от того, насколько хороши другие факторы, или можно утверждать, что правильный выбор амплитуды приведет к заметному увеличению В инкубаторе, если единственным ограничивающим фактором для объема культуры является доставка кислорода. Например, если источник углерода является ограничивающим фактором, независимо от того, насколько хорош перенос кислорода, желаемый объем культуры не будет достигнут.
Амплитуда и скорость вращения
Как амплитуда, так и скорость вращения могут повлиять на перенос кислорода. Если клеточные культуры выращиваются на очень низких скоростях вращения (например, 100 об / мин), различия в амплитуде оказывают незначительное или нет заметного влияния на перенос кислорода. Чтобы достичь наивысшего переноса кислорода, первым шагом является максимально увеличение скорости вращения, а поднос будет должным образом сбалансирован для скорости. Не все клетки могут хорошо расти с высокоскоростными колебаниями, и некоторые клетки, которые чувствительны к силам сдвига, могут умереть от высоких скоростей вращения.
Другие влияния
Другие факторы могут повлиять на перенос кислорода:
* Объем заполнения, конические колбы должны быть заполнены не более одной трети от общего объема. Если должен быть достигнут максимальный передача кислорода, заполните не более 10%. Никогда не заполняйте до 50%.
* Спойлеры: спойлеры эффективны в улучшении переноса кислорода во всех типах культур. Некоторые производители рекомендуют использовать колбы «ультра высокого урожая». Спойлеры на этих колбах увеличивают жидкое трение, и шейкер может не достигать максимальной установленной скорости.
Корреляция между амплитудой и скоростью
Центробежная сила в шейкере может быть рассчитана с использованием следующего уравнения
FC = RPM2× амплитуда
Существует линейная взаимосвязь между центробежной силой и амплитудой: если вы используете амплитуду 25 мм до амплитуды 50 мм (на той же скорости), центробежная сила увеличивается в 2 в 2.
Существует квадратная связь между центробежной силой и скоростью вращения.
Если скорость увеличивается в 2 раза (та же амплитуда), центробежная сила увеличивается в 4 в 4. Если скорость увеличивается в 3 в 3, центробежная сила увеличивается в 9!
Если вы используете амплитуду 25 мм, инкубируйте с заданной скоростью. Если вы хотите достичь той же центробежной силы с амплитудой 50 мм, скорость вращения должна быть рассчитана как квадратный корень 1/2, поэтому вам следует использовать 70% скорости вращения для достижения тех же условий инкубации.
Обратите внимание, что приведенное выше является лишь теоретическим методом расчета центробежной силы. Есть и другие влиятельные факторы в реальных приложениях. Этот метод расчета дает приблизительные значения для эксплуатационных целей.
Время публикации: сентябрь-10-2023