Kako izbrati pravilno amplitudo Shakerja?
Kakšna je amplituda stresarja?
Amplituda stresalnika je premer palete v krožnem gibanju, ki se včasih imenuje simbol "premer nihanja" ali "Premer tira": Ø. Radobio ponuja standardne stresalce z amplitudami 3 mm, 25 mm, 26 mm in 50 mm,. Na voljo so tudi prilagojeni stresalci z drugimi amplitudnimi velikostmi.
Kaj je hitrost prenosa kisika (OTR)?
Hitrost prenosa kisika (OTR) je učinkovitost kisika, ki se prenaša iz atmosfere v tekočino. Višja kot vrednost OTR pomeni večjo učinkovitost prenosa kisika.
Vpliv amplitude in hitrosti vrtenja
Oba dejavnika vplivata na mešanje medija v kulturni bučki. Boljše kot je mešanje, boljša je hitrost prenosa kisika (OTR). Po teh smernicah je mogoče izbrati najprimernejšo amplitudo in hitrost rotacije.
Na splošno lahko izbirate 25 mm ali 26 mm amplitude kot univerzalna amplituda za vse kulturne aplikacije.
Bakterijske, kvasovka in glivične kulture:
Prenos kisika v tresečih bučkah je veliko manj učinkovit kot pri bioreaktorjih. Prenos kisika je lahko v večini primerov omejujoči dejavnik za kulture tresenja bučk. Amplituda je povezana z velikostjo stožčastih bučk: večje bučke uporabljajo večje amplitude.
Priporočilo: 25 mm amplituda za stožčaste bučke od 25 ml do 2000 ml.
50 mm amplituda za stožčaste bučke od 2000 ml do 5000 ml.
Celična kultura:
* Celična kultura sesalcev ima relativno nizko potrebo po kisiku.
* Za 250 ml bučke za stresanje je mogoče zagotoviti zadostno dostavo kisika v razmeroma širokem razponu amplitud in hitrosti (20-50 mm amplituda; 100-300rpm).
* Za bučke večjega premera (Fernbach bučke) je priporočljiva amplituda 50 mm.
* Če se uporabljajo vrečke za enkratno uporabo, priporočamo 50 mm amplituda.
Mikrotiter in plošče z globoko jamico:
Za mikrotitrske in globoke plošče obstajata dve različni metodi za pridobitev največjega prenosa kisika!
* 50 mm amplituda s hitrostjo najmanj 250 vrt./min.
* Uporabite amplitudo 3 mm pri 800-1000 vrtljajih.
V mnogih primerih, tudi če je izbrana razumna amplituda, morda ne bo povečala volumna biokulture, ker lahko na povečanje volumna vpliva več dejavnikov. Na primer, če en ali dva od desetih dejavnikov nista idealna, bo povečanje obsega kulture omejeno, ne glede na to, kako dobri so drugi dejavniki, ali pa bi lahko trdili, da bo pravilna izbira amplitude povzročila opazno povečanje V inkubatorju, če je edini omejevalni dejavnik za količino kulture dovajanje kisika. Na primer, če je vir ogljika omejujoči dejavnik, ne glede na to, kako dober je prenos kisika, želenega obsega kulture ne bo dosežen.
Amplituda in hitrost vrtenja
Tako amplituda kot rotacijska hitrost lahko vplivata na prenos kisika. Če se celične kulture gojijo z zelo nizkimi rotacijskimi hitrostmi (npr. 100 vrt / min), imajo razlike v amplitudi malo ali nič opaznega učinka na prenos kisika. Da bi dosegli najvišji prenos kisika, je prvi korak čim bolj povečati hitrost rotacije in pladenj bo pravilno uravnotežen za hitrost. Ne morejo vse celice dobro rasti z visokimi nihanji, nekatere celice, ki so občutljive na strižne sile, pa lahko umrejo zaradi visokih rotacijskih hitrosti.
Drugi vplivi
Drugi dejavniki lahko vplivajo na prenos kisika :.
* Konične bučke je treba zapolniti na največ tretjini celotne volumna. Če je treba doseči največji prenos kisika, napolnite na največ 10%. Nikoli ne napolnite do 50%.
* Spojlerji: Spoilerji so učinkoviti pri izboljšanju prenosa kisika v vseh vrstah kultur. Nekateri proizvajalci priporočajo uporabo bučk "ultra visokega donosa". Spoilerji na teh bučkah povečajo trenje tekočine in stresalec morda ne bo dosegel največje nastavljene hitrosti.
Korelacija med amplitudo in hitrostjo
Centrifugalna sila v stresalniku je mogoče izračunati z naslednjo enačbo
Fc = RPM2× amplituda
Obstaja linearno razmerje med centrifugalno silo in amplitudo: če uporabljate 25 mm amplitudo do 50 mm amplitude (z isto hitrostjo), se centrifugalna sila poveča za faktor 2.
Med centrifugalno silo in rotacijsko hitrostjo obstaja kvadratno razmerje.
Če se hitrost poveča za faktor 2 (enaka amplituda), se centrifugalna sila poveča za faktor 4. Če se hitrost poveča za faktor 3, se centrifugalna sila poveča za faktor 9!
Če uporabljate amplitudo 25 mm, inkubirajte z dano hitrostjo. Če želite doseči isto centrifugalno silo z amplitudo 50 mm, je treba rotacijsko hitrost izračunati kot kvadratni koren 1/2, zato morate za dosego enakih inkubacijskih pogojev uporabiti 70% rotacijske hitrosti.

Upoštevajte, da je zgoraj navedeno le teoretična metoda izračuna centrifugalne sile. V resničnih aplikacijah obstajajo tudi drugi vplivni dejavniki. Ta način izračuna daje približno vrednosti za operativne namene.
Čas objave: 10. september 201023