中文
Athari za tofauti za joto kwenye tamaduni ya seli
Joto ni paramu muhimu katika tamaduni ya seli kwa sababu inaathiri kupatikana kwa matokeo. Mabadiliko ya joto hapo juu au chini ya 37 ° C yana athari kubwa sana kwenye kinetiki za ukuaji wa seli za seli za mamalia, sawa na ile ya seli za bakteria. Mabadiliko katika usemi wa jeni na marekebisho katika muundo wa seli, ukuaji wa mzunguko wa seli, utulivu wa mRNA unaweza kugunduliwa katika seli za mamalia baada ya saa moja saa 32ºC. Mbali na ukuaji wa seli zinazoathiri moja kwa moja, mabadiliko katika hali ya joto pia huathiri pH ya media, kwani umumunyifu wa CO2 hubadilisha pH (pH huongezeka kwa joto la chini). Seli za mamalia zilizohifadhiwa zinaweza kuvumilia joto kubwa hupungua. Wanaweza kuhifadhiwa kwa 4 ° C kwa siku kadhaa na wanaweza kuvumilia kufungia hadi -196 ° C (kwa kutumia hali sahihi). Walakini, hawawezi kuvumilia joto hapo juu karibu 2 ° C juu ya kawaida kwa zaidi ya masaa machache na watakufa haraka kwa 40 ° C na hapo juu. Ili kuhakikisha upeo wa matokeo, hata ikiwa seli zinaendelea kuishi, utunzaji unahitaji kuchukuliwa ili kudumisha hali ya joto mara kwa mara wakati wa incubation na utunzaji wa seli nje ya incubator.
Sababu za tofauti za joto ndani ya incubator
Utakuwa umegundua kuwa wakati mlango wa incubator unafunguliwa, hali ya joto huanguka haraka kwa bei iliyowekwa ya 37 ° C. Kwa ujumla, hali ya joto itapona ndani ya dakika chache baada ya mlango kufungwa. Kwa kweli, tamaduni za tuli zinahitaji wakati wa kupona kwa joto lililowekwa kwenye incubator. Sababu kadhaa zinaweza kuathiri wakati inachukua kwa tamaduni ya seli kupata tena joto baada ya matibabu nje ya incubator. Sababu hizi ni pamoja na:
- ▶ Urefu wa muda seli zimekuwa nje ya incubator
- ▶ Aina ya chupa ambayo seli hupandwa (jiometri huathiri uhamishaji wa joto)
- ▶ Idadi ya vyombo kwenye incubator.
- ▶ Kuwasiliana moja kwa moja kwa Flaski na rafu ya chuma huathiri ubadilishanaji wa joto na kasi ya kufikia joto bora, kwa hivyo ni bora kuzuia safu za taa na kuweka kila chombo
- ▶ Moja kwa moja kwenye rafu ya incubator.
Joto la awali la vyombo vyovyote na media inayotumiwa pia itaathiri wakati inachukua kwa seli kuwa katika hali yao bora; Chini ya joto lao, inachukua muda mrefu.
Ikiwa mambo haya yote yatabadilika kwa wakati, pia yataongeza utofauti kati ya majaribio. Inahitajika kupunguza kushuka kwa joto, hata ikiwa haiwezekani kila wakati kudhibiti kila kitu (haswa ikiwa watu kadhaa wanatumia incubator sawa).
Jinsi ya kupunguza tofauti za joto na kupunguza wakati wa kupona joto
Kwa preheating kati
Watafiti wengine wamezoea kuwasha chupa nzima za media katika umwagaji wa maji wa 37 ° C ili kuwaleta kwenye joto hili kabla ya matumizi. Inawezekana pia preheat kati katika incubator ambayo hutumika tu kwa preheating ya kati na sio kwa tamaduni ya seli, ambapo kati inaweza kufikia joto bora bila kuvuruga tamaduni za seli kwenye incubator nyingine. Lakini hii, kwa kadiri tunavyojua, kawaida sio gharama ya bei nafuu.
Ndani ya incubator
Fungua mlango wa incubator kidogo iwezekanavyo na uifunge haraka. Epuka matangazo baridi, ambayo huunda tofauti za joto kwenye incubator. Acha nafasi kati ya Flasks ili kuruhusu hewa kuzunguka. Rafu ndani ya incubator zinaweza kukamilishwa. Hii inaruhusu usambazaji bora wa joto kwani inaruhusu hewa kupita kupitia shimo. Walakini, uwepo wa shimo unaweza kusababisha tofauti katika ukuaji wa seli, kwa sababu kuna tofauti ya joto kati ya eneo hilo na mashimo na eneo lenye meta. Kwa sababu hizi, ikiwa majaribio yako yanahitaji ukuaji sawa wa tamaduni ya seli, unaweza kuweka taa za kitamaduni kwenye chuma inasaidia na nyuso ndogo za mawasiliano, ambazo kawaida sio lazima katika tamaduni ya kawaida ya seli.
Kupunguza wakati wa usindikaji wa seli
Ili kupunguza wakati wa matumizi katika mchakato wa matibabu ya seli, unahitaji
- ▶ Panga vifaa na vifaa vyote muhimu kabla ya kuanza kufanya kazi.
- ▶ Fanya kazi haraka na vizuri, kukagua njia za majaribio mapema ili shughuli zako ziwe za kurudia na automatiska.
- ▶ Punguza mawasiliano ya vinywaji na hewa iliyoko.
- ▶ Kudumisha joto la kila wakati katika maabara ya utamaduni wa seli ambapo unafanya kazi.
Wakati wa chapisho: Jan-03-2024