中文
Epekto ng pagkakaiba -iba ng temperatura sa kultura ng cell
Ang temperatura ay isang mahalagang parameter sa kultura ng cell dahil nakakaapekto ito sa muling paggawa ng mga resulta. Ang mga pagbabago sa temperatura sa itaas o sa ibaba ng 37 ° C ay may isang napaka makabuluhang epekto sa mga kinetics ng paglaki ng cell ng mga selula ng mammalian, na katulad ng mga cell ng bakterya. Ang mga pagbabago sa pagpapahayag ng gene at pagbabago sa istraktura ng cellular, pag -unlad ng cell cycle, ang katatagan ng mRNA ay maaaring makita sa mga selula ng mammalian pagkatapos ng isang oras sa 32ºC. Bilang karagdagan sa direktang nakakaapekto sa paglaki ng cell, ang mga pagbabago sa temperatura ay nakakaapekto rin sa pH ng media, dahil ang solubility ng CO2 ay nagbabago sa pH (ang pagtaas ng pH sa mas mababang temperatura). Ang mga kulturang mammalian cells ay maaaring magparaya sa makabuluhang pagbawas sa temperatura. Maaari silang maiimbak sa 4 ° C sa loob ng maraming araw at maaaring tiisin ang pagyeyelo sa -196 ° C (gamit ang naaangkop na mga kondisyon). Gayunpaman, hindi nila maaaring tiisin ang mga temperatura sa itaas ng tungkol sa 2 ° C sa itaas ng normal nang higit sa ilang oras at mabilis na mamamatay sa 40 ° C at sa itaas. Upang matiyak ang maximum na muling paggawa ng mga resulta, kahit na ang mga cell ay makakaligtas, kailangang gawin ang pangangalaga upang mapanatili ang temperatura nang pare -pareho hangga't maaari sa panahon ng pagpapapisa ng itlog at paghawak ng mga cell sa labas ng incubator.
Mga dahilan para sa mga pagkakaiba -iba ng temperatura sa loob ng incubator
Mapapansin mo na kapag binuksan ang pinto ng incubator, mabilis na bumaba ang temperatura sa itinakdang halaga ng 37 ° C. Sa pangkalahatan, ang temperatura ay mababawi sa loob ng ilang minuto pagkatapos sarado ang pinto. Sa katunayan, ang mga static na kultura ay nangangailangan ng oras upang mabawi sa itinakdang temperatura sa incubator. Ang isang bilang ng mga kadahilanan ay maaaring makaapekto sa oras na kinakailangan para sa isang cell culture upang mabawi ang temperatura pagkatapos ng paggamot sa labas ng incubator.Ang mga kadahilanan na ito ay kasama ang ：
- ▶ Ang haba ng oras ng mga cell ay wala sa incubator
- ▶ Ang uri ng flask kung saan lumaki ang mga cell (nakakaapekto ang geometry sa paglipat ng init)
- ▶ Bilang ng mga lalagyan sa incubator.
- ▶ Ang direktang pakikipag -ugnay sa mga flasks na may istante ng bakal ay nakakaapekto sa palitan ng init at ang bilis ng pag -abot sa pinakamainam na temperatura, kaya mas mahusay na maiwasan ang mga stack ng mga flasks at ilagay ang bawat sisidlan
- ▶ Direkta sa istante ng incubator.
Ang paunang temperatura ng anumang mga sariwang lalagyan at media na ginamit ay makakaapekto din sa oras na kinakailangan para sa mga cell na maging sa kanilang pinakamainam na estado; Ang mas mababa ang kanilang temperatura, mas mahaba ito.
Kung ang lahat ng mga salik na ito ay nagbabago sa paglipas ng panahon, madaragdagan din nila ang pagkakaiba -iba sa pagitan ng mga eksperimento. Kinakailangan upang mabawasan ang mga pagbabagu -bago ng temperatura, kahit na hindi laging posible na kontrolin ang lahat (lalo na kung maraming tao ang gumagamit ng parehong incubator).
Paano mabawasan ang mga pagkakaiba -iba ng temperatura at bawasan ang oras ng pagbawi ng temperatura
Sa pamamagitan ng pag -init ng daluyan
Ang ilang mga mananaliksik ay nasanay sa pre-warming buong bote ng media sa isang 37 ° C na paliguan ng tubig upang dalhin sila sa temperatura na ito bago gamitin. Posible ring i -preheat ang daluyan sa isang incubator na ginagamit lamang para sa medium preheating at hindi para sa cell culture, kung saan ang daluyan ay maaaring maabot ang isang pinakamainam na temperatura nang hindi nakakagambala sa mga kultura ng cell sa isa pang incubator. Ngunit ito, tulad ng alam natin, ay karaniwang hindi isang abot -kayang gastos.
Sa loob ng incubator
Buksan ang pintuan ng incubator nang kaunti hangga't maaari at isara ito nang mabilis. Iwasan ang mga malamig na lugar, na lumikha ng mga pagkakaiba sa temperatura sa incubator. Mag -iwan ng puwang sa pagitan ng mga flasks upang payagan ang hangin na mag -ikot. Ang mga istante sa loob ng incubator ay maaaring maging perforated. Pinapayagan nito para sa mas mahusay na pamamahagi ng init dahil pinapayagan nito ang hangin na dumaan sa mga butas. Gayunpaman, ang pagkakaroon ng mga butas ay maaaring humantong sa mga pagkakaiba -iba sa paglaki ng cell, dahil mayroong pagkakaiba sa temperatura sa pagitan ng lugar na may mga butas at lugar na may meta. Para sa mga kadahilanang ito, kung ang iyong mga eksperimento ay nangangailangan ng lubos na pantay na paglaki ng kultura ng cell, maaari mong ilagay ang kultura flasks sa mga suportang metal na may mas maliit na mga ibabaw ng contact, na karaniwang hindi kinakailangan sa nakagawiang kultura ng cell.
Pag -minimize ng oras ng pagproseso ng cell
Upang mabawasan ang paggastos ng oras sa proseso ng paggamot ng cell, kailangan mo
- ▶ Ayusin ang lahat ng mga kinakailangang materyales at tool bago ka magsimulang magtrabaho.
- ▶ Magtrabaho nang mabilis at maayos, suriin ang mga eksperimentong pamamaraan nang maaga upang ang iyong mga operasyon ay maging paulit -ulit at awtomatiko.
- ▶ Paliitin ang pakikipag -ugnay sa mga likido na may nakapaligid na hangin.
- ▶ Panatilihin ang isang palaging temperatura sa Cell Culture Lab kung saan ka nagtatrabaho.
Oras ng Mag-post: Jan-03-2024