中文
Sıcaklık varyasyonunun hücre kültürü üzerindeki etkisi
Sıcaklık, hücre kültüründe önemli bir parametredir, çünkü sonuçların tekrarlanabilirliğini etkiler. 37 ° C'nin üstünde veya altında sıcaklık değişimleri, bakteriyel hücrelerinkine benzer şekilde memeli hücrelerinin hücre büyüme kinetiği üzerinde çok önemli bir etkiye sahiptir. Gen ekspresyonundaki değişiklikler ve hücresel yapıda modifikasyonlar, hücre döngüsü ilerlemesi, mRNA stabilitesi memeli hücrelerinde bir saat sonra 32ºC'de tespit edilebilir. Hücre büyümesini doğrudan etkilemeye ek olarak, sıcaklık değişiklikleri de CO2'nin çözünürlüğü pH'ı değiştirdiğinden (daha düşük sıcaklıklarda pH artar) ortamın pH'ını etkiler. Kültürlenmiş memeli hücreleri önemli sıcaklık düşüşlerini tolere edebilir. Birkaç gün boyunca 4 ° C'de saklanabilirler ve dondurmayı -196 ° C'ye (uygun koşulları kullanarak) tolere edebilirler. Bununla birlikte, birkaç saatten fazla bir süre için normal normalin üzerindeki sıcaklıkları tolere edemezler ve 40 ° C ve üstünde hızlı bir şekilde ölecektir. Sonuçların maksimum tekrarlanabilirliğini sağlamak için, hücreler hayatta kalsa bile, inkübatör dışındaki hücrelerin inkübasyonu ve işlenmesi sırasında sıcaklığı olabildiğince sabit tutmak için dikkate alınmalıdır.
İnkübatör içindeki sıcaklık değişimlerinin nedenleri
İnkübatör kapısı açıldığında, sıcaklığın hızla 37 ° C ayar değerine düştüğünü fark etmiş olacaksınız. Genel olarak, sıcaklık kapı kapatıldıktan sonra birkaç dakika içinde iyileşecektir. Aslında, statik kültürlerin inkübatördeki ayarlanan sıcaklığa geri dönmesi için zamana ihtiyaçları vardır. Bir dizi faktör, bir hücre kültürünün inkübatör dışındaki tedaviden sonra sıcaklığı geri kazanması için gereken süreyi etkileyebilir.Bu faktörler arasında ：
- ▶ Hücrelerin inkübatörden çıktığı sürenin uzunluğu
- ▶ Hücrelerin yetiştirildiği şişe tipi (geometri ısı transferini etkiler)
- ▶ İnkübatördeki kap sayısı.
- ▶ Şişelerin çelik rafla doğrudan teması, ısı değişimini ve optimum sıcaklığa ulaşma hızını etkiler, bu nedenle şişe yığınlarından kaçınmak ve her bir gemiyi yerleştirmek daha iyidir
- ▶ Doğrudan inkübatörün rafında.
Kullanılan herhangi bir taze kap ve ortamın başlangıç sıcaklığı, hücrelerin optimal durumlarında olması için gereken süreyi de etkileyecektir; Sıcaklıkları ne kadar düşük olursa o kadar uzun sürer.
Tüm bu faktörler zaman içinde değişirse, deneyler arasındaki değişkenliği de artıracaktır. Her şeyi kontrol etmek her zaman mümkün olmasa bile, bu sıcaklık dalgalanmalarını en aza indirmek gerekir (özellikle birkaç kişi aynı inkübatör kullanıyorsa).
Sıcaklık varyasyonları nasıl en aza indirilir ve sıcaklık geri kazanım süresini azaltılır
Ortamı önceden ısıtarak
Bazı araştırmacılar, kullanmadan önce bu sıcaklığa getirmek için 37 ° C'lik bir su banyosunda tüm medya şişelerini önceden ısıtmaya alışkındır. Ortamın, başka bir inkübatördeki hücre kültürlerini rahatsız etmeden optimal bir sıcaklığa ulaşabileceği hücre kültürü için değil, sadece ortam ön ısıtma için kullanılan bir inkübatörde ön ısıtma da mümkündür. Ancak bu, bildiğimiz kadarıyla, genellikle uygun bir masraf değildir.
İnkübatörün içinde
İnkübatör kapısını mümkün olduğunca az açın ve hızlı bir şekilde kapatın. İnkübatörde sıcaklık farklılıkları yaratan soğuk noktalardan kaçının. Havanın dolaşmasına izin vermek için şişeler arasında boşluk bırakın. İnkübatör içindeki raflar delik açılabilir. Bu, havanın deliklerden geçmesine izin verdiği için daha iyi ısı dağılımına izin verir. Bununla birlikte, deliklerin varlığı hücre büyümesinde farklılıklara yol açabilir, çünkü delikli alan ile meta olan alan arasında bir sıcaklık farkı vardır. Bu nedenlerden dolayı, deneyleriniz hücre kültürünün yüksek derecede eşit büyümesini gerektiriyorsa, kültür şişelerini genellikle rutin hücre kültüründe gerekli olmayan daha küçük temas yüzeylerine sahip metal desteklerine yerleştirebilirsiniz.
Hücre işleme süresini en aza indirme
Hücre tedavisi sürecinde zaman harcamasını en aza indirmek için
- ▶ Çalışmaya başlamadan önce gerekli tüm malzemeleri ve araçları düzenleyin.
- ▶ Hızlı ve sorunsuz çalışın, operasyonlarınız tekrarlayan ve otomatik hale gelmesi için deneysel yöntemleri önceden gözden geçirin.
- ▶ Sıvıların ortam havası ile temasını en aza indirin.
- ▶ Çalıştığınız hücre kültürü laboratuvarında sabit bir sıcaklık koruyun.
Gönderme Zamanı: Ağustos-18-2023