中文
Doğru çalkalayıcı genliği nasıl seçilir?
Bir çalkalayıcının genliği nedir?
Bir çalkalayıcının genliği, bazen “salınım çapı” veya “parça çapı” sembolü olarak adlandırılan dairesel harekette paletin çapıdır: Ø. Radobio, 3mm, 25mm, 26mm ve 50mm genlikleri olan standart çalkalayıcılar sunar. Diğer genlik boyutlarına sahip özelleştirilmiş çalkalayıcılar da mevcuttur.
Oksijen transfer hızı (OTR) nedir?
Oksijen transfer hızı (OTR), oksijenin verimliliği atmosferden sıvıya aktarılır. OTR değeri ne kadar yüksek olursa, oksijen transfer verimliliği o kadar yüksek olur.
Genlik ve dönüş hızının etkisi
Bu faktörlerin her ikisi de kültür şişesindeki ortamın karıştırılmasını etkiler. Karıştırma ne kadar iyi olursa, oksijen transfer hızı (OTR) o kadar iyi olur. Bu yönergelere göre, en uygun genlik ve dönme hızı seçilebilir.
Genel olarak, 25 mm veya 26 mm'lik bir genlik seçmek, tüm kültür uygulamaları için evrensel bir genlik olarak kullanılabilir.
Bakteriyel, maya ve mantar kültürleri:
Sarma şişelerindeki oksijen transferi, biyoreaktörlerden çok daha az verimlidir. Oksijen transferi, çoğu durumda sallanan şişe kültürleri için sınırlayıcı faktör olabilir. Genlik konik şişelerin büyüklüğü ile ilişkilidir: daha büyük şişeler daha büyük genlikler kullanır.
Tavsiye: 25ml'den 2000ml'ye konik şişeler için 25mm genlik.
2000 ml'den 5000 ml'ye konik şişeler için 50 mm genlik.
Hücre Kültürü:
* Memeli hücre kültürünün nispeten düşük bir oksijen gereksinimi vardır.
* 250ml çalkalayıcı şişeleri için, nispeten geniş bir genlik ve hız aralığında (20-50mm genlik; 100-300rpm) yeterli oksijen iletimi sağlanabilir.
* Daha büyük çaplı şişeler (Fernbach şişeleri) için 50 mm'lik bir genlik önerilir.
* Tek kullanımlık kültür torbaları kullanılırsa, 50mm genlik önerilir.
Mikrotitre ve derin oyuklu plakalar:
Mikrotitre ve derin oyuklu plakalar için maksimum oksijen transferi elde etmek için iki farklı yöntem vardır!
* 250 rpm'den az olmayan bir hızda 50 mm genlik.
* 800-1000rpm'de 3mm genlik kullanın.
Birçok durumda, makul bir genlik seçilse bile, biyokültür hacmini arttırmayabilir, çünkü hacim artışı çeşitli faktörlerden etkilenebilir. Örneğin, on faktörün bir veya ikisi ideal değilse, diğer faktörler ne kadar iyi olursa olsun, kültür hacmindeki artış sınırlı olacaktır veya doğru genlik seçiminin belirgin bir artışla sonuçlanacağı söylenebilir. İnkübatörde, kültür hacmi için tek sınırlayıcı faktör oksijen iletimidir. Örneğin, karbon kaynağı sınırlayıcı faktörse, oksijen transferi ne kadar iyi olursa olsun, istenen kültür hacmi elde edilmeyecektir.
Genlik ve dönüş hızı
Hem genlik hem de dönme hızı oksijen transferi üzerinde bir etkiye sahip olabilir. Hücre kültürleri çok düşük dönme hızlarında (örn. 100 rpm) büyütülürse, genlikteki farklılıkların oksijen transferi üzerinde çok az veya hiç belirgin bir etkisi yoktur. En yüksek oksijen transferini elde etmek için, ilk adım dönme hızını mümkün olduğunca arttırmaktır ve tepsi hız için uygun şekilde dengelenecektir. Tüm hücreler yüksek hızlı salınımlarla iyi büyüyemez ve kesme kuvvetlerine duyarlı bazı hücreler yüksek dönme hızlarından ölebilir.
Diğer Etkiler
Diğer faktörlerin oksijen transferi üzerinde bir etkisi olabilir:
* Doldurma hacmi, konik şişeler toplam hacmin üçte birinden fazlasına kadar doldurulmalıdır. Maksimum oksijen transferi elde edilecekse,%10'dan fazla doldurun. Asla%50'ye doldurmayın.
* Spoiler: Spoiler her tür kültürde oksijen transferini iyileştirmede etkilidir. Bazı üreticiler “ultra yüksek verim” şişelerinin kullanılmasını önermektedir. Bu şişelerdeki spoiler sıvı sürtünmesini arttırır ve çalkalayıcı maksimum belirlenen hıza ulaşamaz.
Genlik ve hız arasındaki korelasyon
Bir çalkalayıcıdaki santrifüj kuvvet, aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplanabilir.
Fc = rpm2× genlik
Santrifüj kuvvet ve genlik arasında doğrusal bir ilişki vardır: 50 mm'lik bir genliğe (aynı hızda) 25 mm'lik bir genlik kullanırsanız, santrifüj kuvvet 2 kat artar.
Santrifüj kuvvet ile dönme hızı arasında kare bir ilişki vardır.
Hız 2 faktörü 2 (aynı genlik) arttırılırsa, santrifüj kuvvet 4 faktör artar. Hız 3 kat arttırılırsa, santrifüj kuvvet 9 faktör artar!
25 mm'lik bir genlik kullanırsanız, belirli bir hızda inkübe edin. 50 mm'lik bir genlik ile aynı santrifüj kuvveti elde etmek istiyorsanız, dönme hızı 1/2 kare kökü olarak hesaplanmalıdır, bu nedenle aynı kuluçka koşullarını elde etmek için dönme hızının% 70'ini kullanmalısınız.
Yukarıdakilerin sadece santrifüj kuvveti hesaplamak için teorik bir yöntem olduğunu lütfen unutmayın. Gerçek uygulamalarda başka etkileyici faktörler de vardır. Bu hesaplama yöntemi, operasyonel amaçlar için yaklaşık değerler verir.
Gönderme Zamanı: Eylül-10-2023