صحیح شیکر طول و عرض کا انتخاب کیسے کریں؟
شیکر کا طول و عرض کیا ہے؟
شیکر کا طول و عرض سرکلر حرکت میں پیلیٹ کا قطر ہے، جسے کبھی کبھی "دولن قطر" یا "ٹریک قطر" کی علامت کہا جاتا ہے: Ø۔ Radobio 3mm، 25mm، 26mm اور 50mm کے طول و عرض کے ساتھ معیاری شیکر پیش کرتا ہے۔ دوسرے طول و عرض کے سائز کے ساتھ حسب ضرورت شیکر بھی دستیاب ہیں۔
آکسیجن کی منتقلی کی شرح (OTR) کیا ہے؟
آکسیجن کی منتقلی کی شرح (OTR) ماحول سے مائع میں آکسیجن کی منتقلی کی کارکردگی ہے۔ OTR قدر جتنی زیادہ ہوگی اس کا مطلب ہے کہ آکسیجن کی منتقلی کی کارکردگی اتنی ہی زیادہ ہوگی۔
طول و عرض اور گردش کی رفتار کا اثر
یہ دونوں عوامل کلچر فلاسک میں میڈیم کے اختلاط کو متاثر کرتے ہیں۔ اختلاط جتنا بہتر ہوگا، آکسیجن کی منتقلی کی شرح (OTR) اتنی ہی بہتر ہوگی۔ ان ہدایات پر عمل کرتے ہوئے، سب سے موزوں طول و عرض اور گردشی رفتار کا انتخاب کیا جا سکتا ہے۔
عام طور پر، 25 ملی میٹر یا 26 ملی میٹر طول و عرض کا انتخاب تمام کلچر ایپلی کیشنز کے لیے عالمگیر طول و عرض کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔
بیکٹیریل، خمیر اور فنگل ثقافتیں:
شیک فلاسکس میں آکسیجن کی منتقلی بائیو ری ایکٹرز کے مقابلے میں بہت کم موثر ہے۔ زیادہ تر معاملات میں شیک فلاسک کلچر کے لیے آکسیجن کی منتقلی محدود عنصر ہو سکتی ہے۔ طول و عرض کا تعلق مخروطی فلاسکس کے سائز سے ہے: بڑے فلاسکس بڑے طول و عرض کا استعمال کرتے ہیں۔
تجویز: 25 ملی میٹر سے 2000 ملی لٹر تک مخروطی فلاسکس کے لیے 25 ملی میٹر طول و عرض۔
مخروطی فلاسکس کے لیے 50 ملی میٹر طول و عرض 2000 ملی لیٹر سے 5000 ملی لیٹر تک۔
سیل کلچر:
* ممالیہ خلیوں کی ثقافت میں نسبتاً کم آکسیجن کی ضرورت ہوتی ہے۔
* 250mL شیکر فلاسکس کے لیے، کافی حد تک طول و عرض اور رفتار (20-50mm طول و عرض؛ 100-300rpm) پر کافی آکسیجن کی ترسیل فراہم کی جا سکتی ہے۔
* بڑے قطر کے فلاسکس (Fernbach flasks) کے لیے 50mm کے طول و عرض کی سفارش کی جاتی ہے۔
* اگر ڈسپوزایبل کلچر بیگ استعمال کیے جائیں تو 50 ملی میٹر طول و عرض کی سفارش کی جاتی ہے۔
مائیکرو ٹائٹر اور گہرے کنویں کی پلیٹیں:
مائیکرو ٹائٹر اور گہری کنویں والی پلیٹوں کے لیے زیادہ سے زیادہ آکسیجن کی منتقلی حاصل کرنے کے دو مختلف طریقے ہیں!
* 250 rpm سے کم نہ ہونے کی رفتار پر 50 ملی میٹر طول و عرض۔
* 800-1000rpm پر 3mm طول و عرض کا استعمال کریں۔
بہت سے معاملات میں، یہاں تک کہ اگر معقول طول و عرض کا انتخاب کیا جائے، تو یہ بائیو کلچر کے حجم میں اضافہ نہیں کر سکتا، کیونکہ حجم میں اضافہ کئی عوامل سے متاثر ہو سکتا ہے۔ مثال کے طور پر، اگر دس میں سے ایک یا دو عوامل مثالی نہیں ہیں، تو ثقافت کے حجم میں اضافہ محدود رہے گا چاہے دوسرے عوامل کتنے ہی اچھے کیوں نہ ہوں، یا یہ دلیل دی جا سکتی ہے کہ طول و عرض کے صحیح انتخاب کے نتیجے میں انکیوبیٹر میں نمایاں اضافہ ہو گا اگر ثقافت کے حجم کے لیے واحد محدود عنصر آکسیجن کی ترسیل ہے۔ مثال کے طور پر، اگر کاربن کا ذریعہ محدود کرنے والا عنصر ہے، چاہے آکسیجن کی منتقلی کتنی ہی اچھی کیوں نہ ہو، مطلوبہ کلچر والیوم حاصل نہیں کیا جائے گا۔
طول و عرض اور گردش کی رفتار
طول و عرض اور گردشی رفتار دونوں کا اثر آکسیجن کی منتقلی پر پڑ سکتا ہے۔ اگر سیل کلچر بہت کم گردشی رفتار (مثلاً 100 rpm) پر اگائے جاتے ہیں، تو طول و عرض میں فرق آکسیجن کی منتقلی پر بہت کم یا کوئی قابل توجہ اثر نہیں ڈالتا ہے۔ سب سے زیادہ آکسیجن کی منتقلی کو حاصل کرنے کے لیے، پہلا قدم یہ ہے کہ گردشی رفتار کو جتنا ممکن ہو بڑھایا جائے، اور ٹرے رفتار کے لیے مناسب طریقے سے متوازن ہو جائے گی۔ تمام خلیے تیز رفتار دوغلوں کے ساتھ اچھی طرح سے نشوونما نہیں کر سکتے، اور کچھ خلیے جو قینچ کی قوتوں کے لیے حساس ہوتے ہیں تیز گردشی رفتار سے مر سکتے ہیں۔
دوسرے اثرات
دیگر عوامل آکسیجن کی منتقلی پر اثر ڈال سکتے ہیں:
* فلنگ والیوم، مخروطی فلاسکس کو کل حجم کے ایک تہائی سے زیادہ نہیں بھرنا چاہیے۔ اگر زیادہ سے زیادہ آکسیجن کی منتقلی کو حاصل کرنا ہے تو، 10% سے زیادہ نہ بھریں۔ کبھی بھی 50 فیصد تک نہ بھریں۔
* سپوئلر: سپوئلر ہر قسم کی ثقافتوں میں آکسیجن کی منتقلی کو بہتر بنانے میں موثر ہیں۔ کچھ مینوفیکچررز "الٹرا ہائی یلڈ" فلاسکس کے استعمال کی سفارش کرتے ہیں۔ ان فلاسکس پر سپوئلر مائع رگڑ کو بڑھاتے ہیں اور شیکر زیادہ سے زیادہ سیٹ رفتار تک نہیں پہنچ سکتا ہے۔
طول و عرض اور رفتار کے درمیان ارتباط
شیکر میں سینٹرفیوگل قوت کا حساب درج ذیل مساوات کا استعمال کرتے ہوئے کیا جا سکتا ہے۔
ایف سی = آر پی ایم2× طول و عرض
سینٹرفیوگل قوت اور طول و عرض کے درمیان ایک خطی تعلق ہے: اگر آپ 25 ملی میٹر طول و عرض کو 50 ملی میٹر طول و عرض (اسی رفتار سے) استعمال کرتے ہیں، تو سینٹرفیوگل فورس 2 کے عنصر سے بڑھ جاتی ہے۔
سینٹرفیوگل فورس اور گردشی رفتار کے درمیان ایک مربع رشتہ موجود ہے۔
اگر رفتار کو 2 کے فیکٹر سے بڑھایا جائے (ایک ہی طول و عرض)، تو سینٹرفیوگل فورس 4 کے فیکٹر سے بڑھ جاتی ہے۔ اگر رفتار کو 3 کے فیکٹر سے بڑھایا جائے تو سینٹرفیوگل فورس 9 کے فیکٹر سے بڑھ جاتی ہے!
اگر آپ 25 ملی میٹر کا طول و عرض استعمال کرتے ہیں، تو دی گئی رفتار سے انکیوبیٹ کریں۔ اگر آپ 50 ملی میٹر کے طول و عرض کے ساتھ اسی سینٹرفیوگل قوت کو حاصل کرنا چاہتے ہیں، تو گردشی رفتار کو 1/2 کے مربع جڑ کے حساب سے شمار کیا جانا چاہیے، اس لیے آپ کو اسی انکیوبیشن حالات کو حاصل کرنے کے لیے گردشی رفتار کا 70% استعمال کرنا چاہیے۔
براہ کرم نوٹ کریں کہ مندرجہ بالا صرف سینٹرفیوگل قوت کا حساب لگانے کا ایک نظریاتی طریقہ ہے۔ حقیقی ایپلی کیشنز میں دیگر متاثر کن عوامل ہیں۔ حساب کا یہ طریقہ آپریشنل مقاصد کے لیے تخمینی قدر دیتا ہے۔
پوسٹ ٹائم: جنوری 03-2024